HPO調(diào)控肝臟星形細(xì)胞的分子機(jī)制研究.pdf

1、肝纖維化(hepatic fibrosis，HF)是慢性肝病共有的病理改變，嚴(yán)重危害人類的身體健康。研究表明，肝星形細(xì)胞(hepatic stellate cells，HSCs)的活化是肝纖維化發(fā)生的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞生成素(HepatopoietinHPO)具有明確的抑制HSCs活化的功能。
　　在細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制上，HSCs的活化、增殖、細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrixECM)的合成及分泌

2、是肝纖維化發(fā)生，發(fā)展的中心環(huán)節(jié)，HSCs活化后首先表現(xiàn)為增殖能力增強(qiáng)，表達(dá)平滑肌-肌動(dòng)蛋白(α-smooth musclea ctin，α-SMA)，能夠表達(dá)多種細(xì)胞因子及受體。最近的研究表明瘦素(Leptin)能夠促進(jìn)HSCs的活化。本課題通過western blot檢測(cè)到，經(jīng)加入HPO共同培養(yǎng)后，瘦素活化的HSC-T6細(xì)胞α-SMA的表達(dá)降低，通過BRDU摻入實(shí)驗(yàn)檢測(cè)顯示HPO能夠抑制活化的HSC-T6細(xì)胞的增殖，但沒有明顯改變HS

3、C-T6細(xì)胞的細(xì)胞周期，也不影響HSC-T6細(xì)胞的凋亡。下一步我們檢測(cè)了活化HSC-T6細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的變化。HSCs的活化與增殖是肝纖維化發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)是引起HSCs活化與增殖并導(dǎo)致肝纖維化發(fā)生的主要信號(hào)傳導(dǎo)通路之一，它包括P38、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）

4、、c-jun氨基末端激酶(c-junN-terminal Kinase，JNK)三條主要的信號(hào)途徑。本課題通過western blot檢測(cè)到HPO能夠抑制HSC-T6細(xì)胞的MAPK通路的活化。在明確HPO抑制HSC-T6細(xì)胞活化后，本課題進(jìn)一步研究了HPO抑制HSC-T6細(xì)胞活化相關(guān)基因的表達(dá)。通過real-timePCR，我們發(fā)現(xiàn)，HPO能夠抑制活化的HSC-T6細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth facto