蒙古口蘑分子鑒定及其菌絲體液體發(fā)酵技術(shù)與應(yīng)用.pdf

1、蒙古口蘑(Tricholoma mongolicum Imai)主要分布在蒙古高原草原區(qū)，為中外馳名的野生食用菌，近幾十年來逐步瀕臨滅絕，且人工栽培尚未獲得實質(zhì)性的突破，亟待對其基因資源、發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)及其產(chǎn)物營養(yǎng)價值開展研究。
　　本論文應(yīng)用簡單重復(fù)序列間區(qū)(ISSR)技術(shù)對含蒙古口蘑在內(nèi)的16個菌株進(jìn)行了分子鑒別;同時，采用單因素及正交試驗研究了蒙古口蘑菌絲體液體發(fā)酵工藝和菌絲體制成口蘑醬的配方;采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化了菌絲體胞內(nèi)多

2、糖的提取工藝，分析了胞內(nèi)多糖對嗜酸乳桿菌的促生長作用，探討了蒙古口蘑多糖作為益生元的可能性。主要研究結(jié)果如下:
　　1.從12條已知的微衛(wèi)星序列引物中篩選出2個適用于蒙古口蘑鑒定的引物，建立了用于蒙古口蘑鑒定的ISSR方法。
　　2.以蒙古口蘑胞內(nèi)多糖和胞外多糖為目標(biāo)產(chǎn)物，采用單因素實驗和正交實驗，確定蒙古口蘑菌株搖瓶發(fā)酵最佳培養(yǎng)工藝條件為:酵母膏2％、KH2PO40.3％、葡萄糖3％、MgSO40.3％，接種量12％、溫度

3、25℃、pH6.5左右、轉(zhuǎn)速150 r/min。在此條件下，胞內(nèi)多糖產(chǎn)量可達(dá)1.180g/L，胞外多糖產(chǎn)量可達(dá)1.078 g/L。
　　3.采用響應(yīng)面法對口蘑菌絲體胞內(nèi)多糖的提取工藝進(jìn)行研究，獲得菌絲體多糖最佳熱水浸提的工藝條件為:浸提溫度為85℃、浸提時間2.2h、料液比為1∶32 g/mL，此時多糖得率為7.36％。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)行超聲波輔助熱水浸提胞內(nèi)多糖工藝研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，多糖得率可達(dá)12.92％以上。
　　4.將上

4、述口蘑胞內(nèi)多糖與傳統(tǒng)益生元菊粉進(jìn)行比較，檢測其對益生菌發(fā)酵酸乳的影響。發(fā)現(xiàn)口蘑多糖濃度為0.6％、菊粉濃度為3％時，發(fā)酵乳樣品中嗜酸乳桿菌的活菌數(shù)和黏度達(dá)到最大值，均高于對照組，菌落數(shù)的對數(shù)值分別可達(dá)10.02和10.18（菌落總數(shù)分別為1.05×1010 cfu·mL-1和1.51×1010cfu·mL-1）;在pH值測定實驗中，當(dāng)口蘑多糖濃度為0.6％和菊粉濃度為3％時，出現(xiàn)最低pH值（分別為5.02和4.98），研究結(jié)果證實了胞內(nèi)