絲素-殼聚糖共混膜與頜下腺細(xì)胞體外復(fù)合培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名：量望日期：趁!監(jiān)基蘭閹中國(guó)醫(yī)科

2、大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解中國(guó)醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容(保密內(nèi)容除外)，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文

3、作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：王哲五目的探討絲素殼聚糖共混膜(SilkfibroinchitosanblendSFCS)與頜下腺細(xì)胞體外復(fù)合培養(yǎng)的可行性，為進(jìn)一步構(gòu)建功能性的頜下腺組織提供依據(jù)。方法體外組織塊法原代培養(yǎng)3天齡SD大鼠的頜下腺細(xì)胞(RSMGcell)，免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行細(xì)胞來(lái)源鑒定，傳代。將濃度為20x104／ml的第2代頜下腺細(xì)胞懸液接種于5mmx5mmx2mm絲素殼聚糖共混膜體外復(fù)合培養(yǎng)，作為實(shí)驗(yàn)組。同時(shí)將20x10

4、4／wtl的第2代頜下腺細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)板體外培養(yǎng)，作為對(duì)照組。分別于接種后1h、2h、4h、8h、24h，測(cè)定實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組SD大鼠頜下腺細(xì)胞的附著率。倒置相差顯微鏡定期觀察2組SD大鼠頜下腺細(xì)胞的生長(zhǎng)情況和形態(tài)變化，并于復(fù)合培養(yǎng)的第3、7天取材，掃描電鏡觀察頜下腺細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。MTT法分別檢測(cè)2組SD大鼠頜下腺細(xì)胞的增殖情況。分別取復(fù)合培養(yǎng)1天到lO天的培養(yǎng)上清液，測(cè)定淀粉酶含量，檢測(cè)2組SD大鼠頜下腺細(xì)胞的分泌功能。Hoech

5、stPI染色，檢測(cè)細(xì)胞活力。采用SPSSforwindows130統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行兩個(gè)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=O05，P005認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果成功的將SD大鼠頜下腺細(xì)胞(RSMGcell)與制備出的絲素殼聚糖共混膜體外復(fù)合培養(yǎng)。并觀察到實(shí)驗(yàn)組于接種lh時(shí)RSMGcell即開(kāi)始附著于絲素殼聚糖共混膜上，4h時(shí)達(dá)到60％以上，8h時(shí)80％以上RSMGvell附著，24h時(shí)93％左右的RSMGcell附著。而對(duì)照組RSMGce