5-氨基酮戊酸光動(dòng)力(ALA-PDT)對(duì)白念珠菌作用的研究.pdf

1、目的：
　　1、研究ALA在白念珠菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化為PpⅨ的熒光藥代動(dòng)力學(xué)，為ALA在其體內(nèi)進(jìn)行光動(dòng)力作用的前提條件提供可靠依據(jù)。
　　2、研究不同孵育時(shí)間下ALA-PDT對(duì)白念珠菌的抗菌效應(yīng)，確定其殺菌能力，探討白念珠菌病治療的最佳敷藥時(shí)間。
　　3、觀察ALA-PDT對(duì)白念株菌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響，為研究ALA-PDT抗菌的作用機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。
　　4、測(cè)定ALA-PDT作用后的白念珠菌對(duì)氟康唑的MIC值，為光動(dòng)力

2、療法與氟康唑聯(lián)合治療白念珠菌病提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1、利用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)白念珠菌體內(nèi)PpⅨ產(chǎn)生情況。
　　2、平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定不同孵育時(shí)間下ALA-PDT作用后菌落形成單位數(shù)。
　　3、利用透射電鏡觀察ALA-PDT對(duì)白念珠菌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響。
　　4、微量稀釋法檢測(cè)ALA-PDT作用前后的白念珠菌對(duì)氟康唑MIC值的差異。
　　結(jié)果：
　　1、100mmol/L ALA與菌

3、液37℃避光孵育30min后，在激光共聚焦顯微鏡下可見磚紅色熒光物質(zhì)PpⅨ生成。
　　2、各孵育時(shí)間點(diǎn)ALA-PDT作用后的菌落數(shù)不同，其中孵育時(shí)間為30min的菌落數(shù)比其它各孵育時(shí)間點(diǎn)的菌落數(shù)均低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；此外，菌液單純加ALA或單純照光后的菌落數(shù)與生長對(duì)照組的菌落數(shù)之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=1.000）。
　　3、透射電鏡下，ALA-PDT作用后的白念珠菌細(xì)胞腫脹變形，細(xì)胞壁、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)不完整，

4、細(xì)胞壁疏松，細(xì)胞膜與細(xì)胞壁之間間隙大小不一，部分細(xì)胞可見細(xì)胞壁棉絮狀致密外層或細(xì)胞膜局灶性缺失的現(xiàn)象。
　　4、微量稀釋法檢測(cè)各組酵母細(xì)胞對(duì)氟康唑MIC值：ALA-PDT作用后的實(shí)驗(yàn)株：0.125ug/ml，未經(jīng)ALA-PDT作用的對(duì)照株：1ug/ml。
　　結(jié)論：
　　1、白念珠菌能很好地吸收ALA并在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為磚紅色熒光PpⅨ。
　　2、ALA-PDT對(duì)白念珠菌有殺傷作用，且在菌液與ALA孵育30min后，該