五味子質(zhì)量控制方法研究.pdf

1、本研究分別建立了五味子藥材GC和HPLC色譜指紋圖譜,并對(duì)藥材質(zhì)量進(jìn)行了評(píng)價(jià)。分別建立了五味子藥材揮發(fā)油中4種成分的同時(shí)含量測(cè)定,藥材中10種木脂素成分的同時(shí)含量測(cè)定,藥材中3種脂肪酸的同時(shí)含量測(cè)定方法。較系統(tǒng)地對(duì)五味子藥材進(jìn)行了質(zhì)量控制方法研究。以上方法也為區(qū)別南、北五味子提供了依據(jù),為南、北五味子的合理使用提供了參考。
　　 建立了五味子藥材GC色譜指紋圖譜,并指認(rèn)了其中的5種成分。采用DB-17石英毛細(xì)管色譜柱(30 m×

2、0.25 mm×0.25μm、),以N2為載氣,流速為1.2 mL·min-1,分流比為50:1,進(jìn)樣口溫度和檢測(cè)器溫度分別為230℃和250℃,升溫程序?yàn)?50℃為起始溫度維持2min,以10℃·min-1升溫至130℃,維持20min,以30℃·min-1升溫至190℃,維持6min,再以10℃·min-1升溫至210℃,維持3min。對(duì)14批北五味子和12批南五味子藥材進(jìn)行GC色譜指紋圖譜分析。對(duì)五味子藥材GC指紋圖譜獲得的色譜峰

3、相對(duì)峰面積進(jìn)行聚類分析。將14批北五味子藥材分為2類,其中Ⅰ類為推薦品,Ⅱ類為一般品。取Ⅰ類中12批藥材,建立共有模式,采用藥典委員會(huì)規(guī)定的色譜指紋圖譜處理軟件,計(jì)算各樣品與共有模式間的相似度,結(jié)果相似度在0.90以上的五味子藥材為推薦藥材。將12批南五味子藥材分為2類,其中Ⅰ類為推薦品,Ⅱ類為一般品。?、耦愔?1批藥材,建立共有模式,采用藥典委員會(huì)規(guī)定的色譜指紋圖譜處理軟件,計(jì)算各樣品與共有模式間的相似度,結(jié)果相似度在0.90以上的五

4、味子藥材為推薦藥材。同時(shí)利用GC色譜指紋圖譜對(duì)北五味子和南五味子進(jìn)行了鑒定分析。
　　 建立了五味子藥材HPLC色譜指紋圖譜,并指認(rèn)了其中的13種成分。采用Luna C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流動(dòng)相為水(A)-乙腈(B),梯度洗脫程序?yàn)?0-20 min,45％B～65％B；20-26 min,65％B:26—50 min,75％B。檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm。對(duì)14批北五味子藥材進(jìn)行HPLC色譜指紋圖譜分析。將

5、14批北五味子藥材分為2類,其中Ⅰ類為推薦品,Ⅱ類為一般品。?、耦愔?3批藥材,建立共有模式,采用藥典委員會(huì)規(guī)定的色譜指紋圖譜處理軟件,計(jì)算各樣品與共有模式間的相似度,結(jié)果相似度在0.90以上的五味子藥材為推薦藥材。
　　 建立了五味子藥材揮發(fā)油中4種成分的同時(shí)含量測(cè)定方法。采用DB-17石英毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm/1×0.25μm),以N2為載氣,流速為1.2 mL·min-1,分流比為10:1,進(jìn)樣口溫度和檢

6、測(cè)器溫度分別為230℃和250℃,檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器(FID),升溫程序?yàn)?50℃為起始溫度維持2min,以10℃·min-1升溫至130℃,維持5min。對(duì)14批北五味子藥材揮發(fā)油中α-蒎烯、β-蒎烯、檸檬烯和乙酸龍腦酯進(jìn)行同時(shí)含量測(cè)定,其線性范圍分別為0.020～0.205 mg·mL-1(r=0.9998),0.006～0.104 mg·mL-1(r=0.9993),0.006～0.162 mg·mL-1(r=0.9994

7、)和0.040～1.000 mg·mL-1(r=0.9993)；平均回收率分別為100.8％(RSD=1.1％),98.7％(RSD=2.9％),99.4％(RSD=0.9％)和96.4％(RSD=0.4％)。該方法簡(jiǎn)便、快捷、重復(fù)性好,為五味子藥材的質(zhì)量控制提供了方法。
　　 建立了五味子藥材中10種木脂素成分的同時(shí)含量測(cè)定方法。采用Luna C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流動(dòng)相為水(A)-乙腈(B),梯度洗脫程

8、序?yàn)?0-20min,45％B-65％B:20-26 min,65％B；26—50 min,75％B。檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm,流速為0.8 mL·min-1,柱溫30℃。對(duì)12批北五味子藥材中的10種活性成分五味子醇甲、戈米辛-D、戈米辛-J、五味子醇乙、前戈米辛、當(dāng)歸酰戈米辛-H、巴豆酰戈米辛-P、五味子甲素、戈米辛-N和五味子乙素進(jìn)行同時(shí)含量測(cè)定,其線性范圍分別為20～200μg·mL-1(r=0.9999),2～20μg·mL-1(

9、r=0.9998),4～40μg·mL-1(r=0.9999),13.3～133.3μg·mL-1(r=0.9999),4～40μg·mL-1(r=0.9995),6.25～62.5μg·mL-1(r=0.9999),6.67～66.7μg·mL-1(r=1.0000),4～401μg·mL-1(r=0.9999),4～40μg·mL-1(r=0.9997)和10～100μg·mL-1(r=1.0000)；平均回收率分別為99.3％(R

10、SD=2.5％),100.2％(RSD=2.5％),102.1％(RSD=1.6％),98.5％(RSD=2.4％),96.5％(RSD=3.2％),99.4％(RSD=2.8％),99.1％(RSD=2.7％),97.5％(RSD=2.5％),101.9％(RSD=3.1％)和100.6％(RSD=3.5％)。該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,為五味子藥材的質(zhì)量控制提供了定量方法。
　　 建立了五味子藥材中3種脂肪酸的同時(shí)含量測(cè)定方

11、法。采用DB-17石英毛細(xì)管色譜柱(30 m x0.25 mm×O.25μm),以N2為載氣,流速為1.2 mL·min-1,分流比為10:1,進(jìn)樣口溫度和檢測(cè)器溫度分別為250℃和250℃,檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器(FID),升溫程序?yàn)?150℃為起始溫度,以5℃·min-1升溫至250℃。對(duì)14批北五味子藥材中棕櫚酸甲酯、油酸甲酯和亞油酸甲酯進(jìn)行同時(shí)含量測(cè)定,其線性范圍分別為0.01～0.1mg·mL-1(r=0.9997),0.