豬冷凍稀釋液中添加不同的抗氧化劑提高凍融后精液品質(zhì)的研究.pdf

1、本次研究的主要目的是評估冷凍稀釋液中添加不同的抗氧化劑對凍精解凍后精子質(zhì)量參數(shù)、膜脂質(zhì)過氧化程度及體外受精率的影響。以手握法采集的豬精液為試驗材料，進(jìn)行處理后，用不同規(guī)格的細(xì)管進(jìn)行了冷凍試驗。試驗主要分3步進(jìn)行：Ⅰ將精液按不同的比例稀釋，以不同的速度離心后，除去上清液，再用冷凍稀釋液進(jìn)行稀釋，然后用不同容量的細(xì)管進(jìn)行冷凍，解凍后對精液品質(zhì)進(jìn)行生物學(xué)檢測；Ⅱ在冷凍稀釋液中添加N-乙酰半胱氨酸、L-半胱氨酸和N-乙酰半胱氨酸+L-半胱氨酸混

2、合物，配制成不同的冷凍稀釋液，冷凍解凍后對精液品質(zhì)進(jìn)行生物學(xué)檢測。Ⅲ在冷凍稀釋液中添加N-乙酰半胱氨酸、L-半胱氨酸和N-乙酰半胱氨酸+L-半胱氨酸混合物，用細(xì)管進(jìn)行冷凍解凍后，對膜脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的程度進(jìn)行生物學(xué)檢測。試驗結(jié)果如下： 1、800轉(zhuǎn)/分離心后，精子的活率、頂體完整率顯著高于500轉(zhuǎn)/分和1000轉(zhuǎn)/分的，而低滲膨脹率卻顯著低于500轉(zhuǎn)/分和1000轉(zhuǎn)/分的(P<0.05)；1000轉(zhuǎn)/分離心后，精子的頂體完整率顯著

3、降低，而低滲膨脹率卻大大地提高(P<0.05)。雖然，不同的離心速度對運動學(xué)參數(shù)沒有影響(P>0.05)，但是800轉(zhuǎn)/分的離心效果要好于500轉(zhuǎn)/分和1000轉(zhuǎn)/分的。 2、精液1：1稀釋與1：2稀釋的結(jié)果，其冷凍后精子的活率差異不顯著(P>0.05)：但1：1稀釋的其冷凍后精子的頂體完整率顯著高于1：2稀釋的(超過了15個百分點)，而低滲膨脹率卻顯著低于1：2的(10個百分點)；在運動學(xué)參數(shù)方面，只有LIN顯著降低(P<0.

4、05)，而對其它的運動學(xué)參數(shù)沒有影響(P>0.05)。從冷凍所使用的細(xì)管來看，兩種不同比例稀釋后，在其各方面的指標(biāo)中，0.5ml細(xì)管的冷凍效果要優(yōu)于0.25ml細(xì)管的，但兩者之間差異不顯著(P>0.05)。 3、與對照組相比，在冷凍稀釋液中添加1mM的N-乙酰半胱氨酸能顯著地提高解凍后精子的活率和頂體完整率，降低精子的低滲膨脹率(P<0.05)。在運動學(xué)參數(shù)方面，只有VAP顯著升高(P<0.05)，而對其它的運動學(xué)參數(shù)沒有影響(

5、P>0.05)。體外胚胎生產(chǎn)的數(shù)據(jù)顯示：在冷凍稀釋液中添加不同濃度的N-乙酰半胱氨酸對卵裂率沒有影響(P>0.05)。 4、與對照組相比，在冷凍稀釋液中添加0.1mg/ml的L-半胱氨酸能顯著地提高解凍后精子的活率和頂體完整率，降低精子的低滲膨脹率(P<0.05)，而對運動學(xué)參數(shù)沒有影響(P>0.05)。體外胚胎生產(chǎn)的數(shù)據(jù)顯示，與對照組、0.2mg/ml處理組和0.3mg/ml處理組相比，在冷凍稀釋液中添加0.1mg/ml的L-

6、半胱氨酸可以顯著地提高卵裂率(P<0.05)。 5、與對照組相比，在冷凍稀釋液中添加1mM N-乙酰半胱氨酸+0.1mg/ml L-半胱氨酸能顯著地提高解凍后精子的活率和頂體完整率，降低精子的低滲膨脹率(P<0.05)。在運動學(xué)參數(shù)方面，只有LIN降低，而VAP、ALH和BCF都顯著提高(P<0.05)。體外胚胎生產(chǎn)的數(shù)據(jù)顯示：與對照組相比,在冷凍稀釋液中添加1mM N-乙酰半胱氨酸+0.1mg/ml L-半胱氨酸，可以顯著地提