延胡索堿及延胡索復方抗冠心病室性心律失常的實驗與臨床研究.pdf

1、目的: 通過動物實驗，比較藥物預處理與缺血預處理對心肌缺血再灌注損傷的作用效果，評價延胡索堿預處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用及其藥理作用機制。 方法與內容:采用SD大鼠，隨機分為6組：假手術組、模型組、缺血預處理組、延胡索堿低、中、高劑量組。建立大鼠心肌缺血再灌注模型，運用膜片鉗技術、流式細胞儀技術、免疫組化、電鏡酶細胞化學和分子生物學等方法，從整體、細胞乃至分子基因水平探討延胡索堿預處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷

2、的保護作用及其藥理作用機制。 結果: 1.室性心律失常發(fā)生率比較：延胡索堿中、高劑量組的室速(VT)和室顫 (VF)的發(fā)生率顯著降低，與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05，P<0.01)，延胡索堿低劑量組上述指標變化無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；與缺血預處理組比較，延胡索堿中、高劑量組的VT和VF的發(fā)生率變化無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。各組對室性早博(VPB)發(fā)生率的影響，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

3、 2.心律失常發(fā)生時間比較：延胡索堿低、中、高劑量組的心律失常出現時間明顯推遲、持續(xù)時間明顯縮短，與模型組比較差異有顯著性(P<0.01)。與缺血預處理組比較，延胡索堿預處理雖也能推遲心律失常出現時間、縮短心律失常持續(xù)時間，但作用較之減弱(P<0.01)。 3.ST段抬高程度比較：在心肌缺血30min，再灌注20min和60min時間點時，假手術組ST段抬高程度無明顯改變，模型組ST段則明顯抬高；與模型組比較，缺血預處理組和延

4、胡索堿預處理各劑量組ST段抬高幅度雖有所降低，但差異無顯著性(P>0.05)。心率變化比較：與模型組比較，延胡索堿低、中、高劑量組，以及缺血預處理組均能明顯減慢心率，差異有顯著性(P<0.01)；與缺血預處理組比較，延胡索低、中劑量組減慢心率的作用較之減弱(P<0.01)，延胡索堿高劑量組則較之增強(P<0.05)。 4.原位末端標記法(TUNEL)檢測大鼠心肌細胞凋亡結果：假手術組心肌僅偶見細胞凋亡發(fā)生，模型組可見大量胞核呈深

5、淺不一棕褐色的凋亡心肌細胞，心肌細胞凋亡指數明顯高于假手術組(P<0.01)；缺血預處理組和延胡索堿高、中、低劑量組凋亡心肌細胞和心肌細胞凋亡指數均較模型組明顯減少(P<0.01)；而缺血預處理組和延胡索堿高劑量組間差異無顯著性(P>0.05)。 5.心肌細胞bcl-2 基因蛋白表達變化：與假手術組比較，抑凋亡基因bcl-2在缺血再灌注后表達明顯減少，心肌細胞bcl-2蛋白陽性表達指數(PEI)明顯低于假手術組(P<0.01)；

6、缺血預處理及用藥后bcl-2 表達增高，缺血預處理組和延胡索堿高、中、低劑量組bcl-2蛋白陽性表達指數(PEI)均較模型組組明顯增高(P<0.05)。而缺血預處理組和延胡索堿高劑量組比較，差異無顯著性(P>0.05)。 6.心肌細胞Fas基因蛋白表達變化：假手術組極少數心肌細胞Fas基因蛋白表達陽性；與假手術組比較，缺血再灌注后Fas基因蛋白表達明顯加強，心肌細胞Fas蛋白陽性表達指數(PEI)明顯高于假手術組(P<0.01)

7、；缺血預處理組和延胡索堿高、中、低劑量組Fas蛋白陽性表達指數(PEI)均較模型組明顯減少(P<0.05)：而缺血預處理組和延胡索堿高劑量組比較，差異無顯著性(P>0.05)。 7.心肌細胞Na<'+>，K<'+>-ATP 酶活力分析：與假手術組比較，心肌缺血再灌注損傷后，心肌細胞Na<'+>K<'+>-ATP酶活力顯著下降(P<0.01)。與模型組比較，除低劑量組(P>0.05)外，缺血預處理組和延胡索堿中、高劑量組的心肌細胞

8、Na<'+>K<'+>-ATP酶活力都明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)：與缺血預處理組比較，延胡索堿中、高劑量組心肌細胞Na<'+>-K<'+>-ATP酶活力差異無顯著性(P>0.05)。 8.心肌細胞Ca<'2+>-ATP 酶活力分析：與假手術組比較，心肌缺血再灌注損傷后，心肌細胞 Ca<'2+>-ATP 酶活力顯著下降(P<0.01)。與模型組比較，除低、中劑量組(P>0.05)外，缺血預處理組和延胡索堿高劑量組的

9、心肌細胞Ca<'2+>-ATP酶活力都明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)：與缺血預處理組比較，延胡索堿高劑量組心肌細胞Ca<'2+>-ATP酶活力差異無顯著性(P>0.05)。 9.單個心肌細胞膜上L-型鈣通道動力學變化 與假手術組比較，模型組平均電流幅值明顯增高(P<0.05)；與模型組比較，延胡索堿低、中劑量組可減弱 L-型鈣通道平均電流幅度值(P<0.05)，但缺血預處理組和延胡索堿高劑量組反而增強L-型鈣

10、通道電流幅度值(P<0.05)。 10.心肌細胞內鈣離子濃度比較：與假手術組比較，模型組心肌細胞內平均鈣離子熒光強度明顯增強(P<0.01)；與模型組比較，缺血預處理組與延胡索堿高、中、低劑量組平均鈣離子熒光強度減弱，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；缺血預處理與延胡索堿高劑量組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 11.心肌缺血、梗死面積比較 (1)心肌缺血面積比較：與模型組比較，除低劑量組(P>0.05)

11、外，其余各組心肌缺血面積均有減少(P0.05)。 (2)心肌梗死面積比較：與模型組比較，缺血預處理組和延胡索堿高、中、低劑量組梗死面積均縮小(P<0.05)；與缺血預處理組比較，除低劑量組(P<0.01)外，延胡索堿高、中劑量組心肌梗死面積與其相當，差異無顯著性(P>0.05)。 結論

12、: 1.對大鼠心肌缺血再灌注室性心律失常而言，延胡索堿預處理不僅可推遲其出現時間，縮短其持續(xù)時間，而且還可降低室速(VT)和室顫(VF)的發(fā)生率，減慢大鼠心肌缺血再灌注損傷后心率的增快。說明延胡索堿預處理具有抗大鼠心肌缺血再灌注室性心律失常的作用。 2．延胡索堿預處理可通過上調缺血再灌注心肌抑凋亡基因bcl-2 的蛋白表達和下調促凋亡基因Fas的蛋白表達，從而抑制心肌細胞凋亡的發(fā)生，保護心肌細胞免受缺血及缺血再灌注的損

13、傷，從而保護心臟功能，具有類似于缺血預處理的內源性抗凋亡保護機制。 3．延胡索堿預處理能顯著提高心肌細胞 Na<'+>-K<'+>-ATPase、Ca<'2+>-ATPase 活性，通過肌漿網 Ca<'2+>-ATP 酶 (肌漿網鈣泵)、Na<'+>-Ca<'2+>交換體系、肌膜Ca<'2+>-ATPas 等途徑將細胞內Ca<'2+>運出細胞外，從而減輕心肌細胞內鈣離子濃度和鈣超載，起到保護心肌細胞的作用。 4．延胡索堿

14、預處理可降低心肌細胞膜上L-型鈣通道平均開放概率，并顯著減弱心肌細胞膜上L-型鈣通道平均電流幅度值，從而阻斷心肌細胞膜L-型鈣通道開放，減少“外鈣內流”、“內鈣釋放”，降低心肌細胞內游離鈣離子的濃度，避免了細胞內鈣離子超載，發(fā)揮保護心肌細胞的作用。 5．延胡索堿預處理與經典缺血預處理一樣，可顯著縮小大鼠心肌缺血再灌注的心肌梗死面積，對缺血再灌注心肌損傷有保護作用。 目的: 觀察延胡索復方桃仁紅花煎對冠心病頻發(fā)室性

15、早博患者的臨床療效。 方法與內容:采用前瞻性試驗性設計方案。遵循隨機、對照、單盲原則進行研究。將60例冠心病頻發(fā)室性早博患者按為1：l隨機分為試驗組與對照組。試驗組采用冠心病西醫(yī)基礎治療加上延胡索復方桃仁紅花煎治療，對照組僅采用單純西醫(yī)基礎治療，不用中醫(yī)中藥治療。通過觀察治療前后室性早博次數的變化以及中醫(yī)證候、癥狀的改變，比較試驗組與對照組二者間的臨床療效。 結果: 1．治療后兩組患者室性早搏療效比較：試驗組總有

16、效率85％，對照組75％，P>0.05，差異無統(tǒng)計學意義，說明兩組患者的療效相當。 2．兩組患者治療前后24h室性早博次數的比較：試驗組和對照組治療前后自身比較，P<0.01，差異有顯著統(tǒng)計學意義。兩組患者治療前后24h室性早博次數差值比較，P>0.05，差異無統(tǒng)計學意義。 3．兩組患者中醫(yī)證候療效比較：試驗組總有效率90％，對照組70％，經X<'2>檢驗P<0.05，差異有統(tǒng)計學意義。 4．兩組患者中醫(yī)癥狀積分

17、比較：治療前后自身比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。試驗組患者治療前后癥狀積分差值明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 5．兩組患者中醫(yī)癥狀療效比較：試驗組心悸中醫(yī)癥狀總有效率為89.7％，對照組為66.7％，兩組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；試驗組胸悶中醫(yī)癥狀總有效率為76.9％％，對照組為45.8％，兩組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)：余各中醫(yī)癥狀療效差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結