栽培人參和西洋參種質(zhì)資源遺傳多樣性研究.pdf

1、本文采用SSR和RAPD分子標(biāo)記技術(shù)，對(duì)栽培人參和西洋參種質(zhì)資源的遺傳多樣性及遺傳分化進(jìn)行研究，揭示人參與西洋參種間的遺傳關(guān)系以及人參各種農(nóng)家類型的遺傳關(guān)系，探討遺傳分化機(jī)制，為遺傳資源的有效保護(hù)和合理利用提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下： (1)采用正交實(shí)驗(yàn)，對(duì)影響人參SSR-PCR反應(yīng)體系的5個(gè)因素(Taq酶用量、Mg<'2+>濃度、dNTP濃度、引物濃度、模板DNA濃度)在4個(gè)水平上進(jìn)行了優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，建立了人參SSR-PCR最

2、佳反應(yīng)體系。同時(shí)，根據(jù)最佳體系篩選擴(kuò)增穩(wěn)定、多態(tài)性豐富的SSR引物，通過梯度PCR確定引物的最他退火溫度。得到人參SSR-PCR反應(yīng)的最佳擴(kuò)增程序。 (2)4對(duì)SSR引物對(duì)栽培人參和西洋參9個(gè)種群的90個(gè)DNA樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增，平均每個(gè)引物擴(kuò)增出4條帶，其中多態(tài)性條帶為14條，多態(tài)位點(diǎn)百分率(P)87.5％。等位基因(Na)平均為6.0000，有效等位基因數(shù)(Ne)平均為4.1688，Shannon多樣性指數(shù)(I)平均為1.5

3、571。人參與西洋參兩個(gè)種間的遺傳距離大于人參各農(nóng)家類型之間的遺傳距離，與形態(tài)標(biāo)記結(jié)淪相符。 (3)19個(gè)RAPD引物對(duì)90個(gè)DNA樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增，平均每個(gè)引物擴(kuò)增出6條帶，其中多態(tài)性條帶為103條，多態(tài)位點(diǎn)百分率(P)90.35％。等位基因(A)平均為1.8684，有效等位基因數(shù)(Ae)平均為1.3468，Shannon多樣性指數(shù)(I)平均為0.3557。RAPD及聚類分析結(jié)果與形態(tài)學(xué)分析結(jié)果基本一致，證實(shí)了RAPD分析方