砷致學習記憶能力損害與海馬c-jun、BDNF表達變化的關(guān)系研究.pdf

1、目的：
　　本研究以大鼠為模型，通過飲水染毒，建立亞慢性砷中毒模型，觀察砷暴露對大鼠學習記憶能力影響、對大鼠腦海馬 c-jun及 BDNF表達影響，以探討砷致學習記憶損害的機制，為砷中毒預防和治療提供科學依據(jù)。
　　方法：
　　1，采用40只清潔級SD大鼠（體重：100±20g）,隨機分為4組,每組10只，雌雄各半。在清潔級動物房內(nèi)飼養(yǎng)。以自由飲水方式染毒，染毒組飲亞砷酸鈉水溶液，染毒組劑量為：2.4mg/L，12mg

2、/L，60mg/L，對照組飲蒸餾水，每天更換飲用水一次，染毒100天。每周稱一次體重。染毒結(jié)束前6天，采用Morris水迷宮實驗檢測大鼠行為學改變。染毒結(jié)束后乙醚麻醉，處死大鼠，冰浴斷頭分離腦組織，-70°冰箱保存。
　　2，指標測定：采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP-AES測定腦總砷含量；Morris檢測大鼠空間學習記憶改變；實時熒光定量（qRT-PCR）測定海馬c-jun mRNA、BDNF mRNA；免疫組化法檢測JU

3、N蛋白水平；酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）測海馬BDNF蛋白含量。
　　3數(shù)據(jù)處理：數(shù)據(jù)經(jīng)Excel雙人錄入，spss17.0統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果：
　　1，大鼠生長變化：實驗期間，染毒組大鼠出現(xiàn)輕微的中毒征表現(xiàn)為脫毛、嗜睡、反應遲鈍，高中劑量個別出現(xiàn)腦偏癱征。各組大鼠在100天染毒期間，體重變化差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。而從大鼠體重變化趨勢圖可發(fā)現(xiàn)，高劑量組大鼠在染毒第7周開始體重較其他組小，體重出現(xiàn)增幅減慢

4、的趨勢。
　　2，大鼠腦重系數(shù)與腦砷：各組大鼠腦重系數(shù)差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。染砷程度不同，染毒組腦砷含量較對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），各組間比較，差異也有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　3，大鼠學習記憶能力改變：定位航行實驗：隨染毒劑量增加，空間記憶能力損害加重。與對照組比較，染砷組大鼠逃逸潛伏期延長，從游泳訓練第三天結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高劑量組大鼠潛伏期與對照組及低劑量組相比，差異有統(tǒng)計學意義（P<

5、0.05），該差異延續(xù)到第四天。而低劑量組與中劑量組較對照組，差異沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）?？臻g探索實驗：隨著染砷濃度的增大，各劑量組大鼠在原平臺象限停留時間縮短，高劑量組與對照組、低劑量組及中劑量組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；在平臺象限的游泳距離隨劑量增加而減少，其中高劑量組與對照組、低劑量組、中劑量組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），中劑量組與對照組比較，差異也有統(tǒng)計學意義，而低劑量組較對照組差異無統(tǒng)計學

6、意義（P>0.05）；在穿越平臺結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，隨劑量改變，穿越平臺次數(shù)依次減少，其中高劑量組與中劑量組較對照組差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），低劑量組較對照組，染毒組間兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　4，腦海馬c-jun表達改變：隨著劑量增加，腦海馬JUN蛋白表達增加，而c-jun mRNA表達下調(diào)。染毒組JUN蛋白的表達較對照組高，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）各組間多重比較差異均有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。

7、c-jun mRNA的相對表達定量中，高劑量組較對照組表達量相對較低，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。
　　5，腦海馬BDNF表達改變：染毒組BDNF蛋白及其mRNA的相對量表達均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）其中高劑量組和中劑量組 BDNF蛋白表達與對照組、低劑量組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；高劑量組BDNF mRNA的相對表達量較對照組相對減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：