Apelin-36對缺氧缺血新生鼠的神經(jīng)保護作用及機制研究.pdf

1、本文從以下兩部分進行了論述。
　　第一部分 Apelin-36對缺氧缺血新生鼠的神經(jīng)保護作用
　　目的:觀察Apelin-36對缺氧缺血新生鼠是否具有神經(jīng)保護作用。
　　方法:將新生7日齡大鼠隨機分成三組:①假手術(shù)組(Sham組);②缺氧缺血組(H/I組);③缺氧缺血加Apelin-36組(Apelin組)。建立缺氧缺血模型,觀察Apelin-36的干預對缺氧缺血模型腦梗死體積及后期神經(jīng)功能的影響。
　　結(jié)果:模

2、型建立后60-90分鐘行為學觀察:H/I組出現(xiàn)肢體蒼白、呼吸變化,部分抽搐等缺氧缺血表現(xiàn),說明模型建立成功,而Apelin組缺氧缺血行為學表現(xiàn)明顯減輕。與H/I組相比,建模后48小時Apelin組腦梗死體積明顯減少(P<0.05);H/I組新生鼠腦缺氧缺血腦損傷側(cè)梗死體積百分比為49.28±2.96％,Apelin組為21.22±2.43％,兩者比較有顯著性差異。
　　缺氧缺血模型成功建立后第7天、14天采用足錯誤實驗進行運動功能

3、觀察:H/I組建模后第7天、14天1分鐘平均足總步數(shù)分別為52.6±5.68、70.9±3.90,明顯低于Sham組(分別為78.50±5.21、91.5±12.47)(P<0.05),而與Apelin組建模后第7天、14天1分鐘平均足總步數(shù)(分別為67.3±5.74、87.5±5.44)比較,Apelin組的神經(jīng)運動功能改善,存在顯著性差異(P<0.05);同樣,計算各組建模后第7天、14天損傷側(cè)前、后足錯誤率(％)發(fā)現(xiàn),Apelin

4、-36能降低缺氧缺血新生鼠的前、后足錯誤率。缺氧缺血模型成功建立后第21天的學習、記憶能力評估:在水迷宮實驗中,Apelin-36縮短了逃避潛伏期、增加了穿越平臺的次數(shù)、提高了游泳速度。這些結(jié)果證明Apelin-36具有近、遠期神經(jīng)保護作用。
　　結(jié)論:Apelin-36的干預能減少缺氧缺血新生鼠梗死體積,改善近遠期神經(jīng)功能障礙。這些結(jié)果提示Apelin-36對缺氧缺血新生鼠腦損傷具有神經(jīng)保護作用。
　　第二部分 Apeli

5、n-36對缺氧缺血新生鼠抗凋亡的神經(jīng)保護作用機制
　　目的:研究PI3K/Akt信號通路抑制劑LY294002在Apelin-36對缺氧缺血新生鼠腦組織內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白表達的影響及Apelin-36與PI3K/Akt信號通路的關(guān)系,探討Apelin-36抗凋亡神經(jīng)保護作用的相關(guān)機制。
　　方法:將實驗動物隨機分為四組:①假手術(shù)組(Sham組);②缺氧缺血組(H/I組);③缺氧缺血加Apelin-36組(Apelin組);④缺氧

6、缺血加Apelin-36加LY294002組(LY294002組)。建模后24小時取缺氧缺血損傷側(cè)腦組織皮質(zhì)和海馬,采用Western blot法測定Cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2、pAkt表達情況。觀察腹腔注射LY294002后對Apelin-36神經(jīng)保護作用的影響。
　　結(jié)果: Western blot法測定凋亡相關(guān)蛋白Cleaved Caspase-3顯示:與Sham組相比,H/I組中Cleaved

7、Caspase-3的表達水平顯著增高(P<0.05),Apelin組Cleaved Caspase-3水平又較H/I組下降(P<0.05),LY294002組再次提高了Cleaved Caspase-3的表達水平(P<0.05);Bax水平檢測結(jié)果亦是如此;Bcl-2表達正好相反,與Sham組相比,H/I組中 Bcl-2的表達水平顯著降低(P<0.05),Apelin組Bcl-2水平又較H/I組上升(P<0.05),LY294002組再

8、次降低了Bcl-2的表達水平(P<0.05)。
　　Western blot法測定pAkt的表達水平發(fā)現(xiàn):Apelin-36增加了Akt磷酸化水平(P<0.05),LY294002又基本恢復到缺氧缺血腦損傷pAkt水平(P<0.05)。
　　這些結(jié)果說明,Apelin-36的干預減少了缺氧缺血新生鼠細胞的凋亡,Apelin-36能減少缺氧缺血神經(jīng)細胞損傷,具有抗凋亡活性,但LY294002又影響了Apelin-36的抗凋亡作