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1、目的: 觀察抗菌肽Cecropin B對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的抑制作用并探討其產(chǎn)生抑制作用的可能機(jī)制。 方法: (1)采用人膀胱癌T24細(xì)胞株及人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株細(xì)胞體外培養(yǎng)法。 (2)我們運(yùn)用絲裂霉素C作對(duì)照,設(shè)立抗菌肽Cecropin B組(CB)、絲裂霉素C組(MMC)和抗菌肽Cecropin B+絲裂霉素C組(CB+MMC)三組藥物,將藥物分別配制成C1=15ug/mL、C2=30ug/mL
2、、C3=60ug/mL、C4=120ug/mL和C5=240ug/mL五個(gè)藥物濃度梯度,運(yùn)用MTT比色法檢測(cè)三組藥物分別對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的抑制作用及其作用特點(diǎn)。 (3)運(yùn)用MTT比色法測(cè)定上述五個(gè)濃度的抗菌肽Cecropin B對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的抑制作用及其作用特點(diǎn)。 (4)運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度抗菌肽Cecropin B(0、5、20、140ug/mL)作用人膀胱癌T24細(xì)胞和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞24h后
3、細(xì)胞周期的變化。 (5)運(yùn)用掃描電鏡觀察240ug/mL抗菌肽Cecropin B作用于膀胱癌T24細(xì)胞24 h后細(xì)胞膜表面變化。 結(jié)果: (1)抗菌肽Cecropin B組、絲裂霉素C組和抗菌肽Cecropin B+絲裂霉素C聯(lián)合組抑制人膀胱癌T24細(xì)胞增殖均呈劑量相關(guān)性,隨著抗菌肽Cecropin B、絲裂霉素C和抗菌肽Cecropin B+絲裂霉素C聯(lián)合組濃度的增加,對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞增殖的抑制率也逐漸增
4、加;抗菌肽Cecropin B與絲裂霉素C兩種藥物同樣對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞有明顯的抑制作用(P<0.05),但兩者抑制率之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),而抗菌肽Cecropin B+絲裂霉素C聯(lián)合組作用人膀胱癌T24細(xì)胞24h后顯著增強(qiáng)對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞的抑制率(P<0.05)。 (2)抗菌肽Cecropin B對(duì)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞無明顯抑制作用(P>0.05)。 (3)不同濃度抗菌肽Cecropin B(0、5、20、
5、140ug/mL)作用于人膀胱癌T24細(xì)胞24 h后,G0/G1期T24細(xì)胞所占比例著上升(P<0.05),G2/M期T24細(xì)胞所占比例顯著下降(P<0.05),隨著抗菌肽Cecropin B濃度的增加,G0/G1期T24細(xì)胞所占比例逐漸上升,G2/M期T24細(xì)胞所占比例逐漸下降,而對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞周期無明顯影響(P>0.05); (4)掃描電鏡顯示濃度為240ug/mL抗菌肽Cecropin B作用24 h后人膀胱癌T2
6、4細(xì)胞細(xì)胞膜出現(xiàn)大小不等的空洞、甚至有的T24細(xì)胞膜出現(xiàn)碎裂。 結(jié)論: (1)抗菌肽Cecropin B和絲裂霉素C對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞生長(zhǎng)增殖均有明顯的抑制作用,但兩者對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞的抑制作用無明顯差異,而抗菌肽Cecropin B與絲裂霉素C聯(lián)合后顯著增強(qiáng)對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的抑制作用。 (2)抗菌肽Cecropin B對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞產(chǎn)生重要的可選擇的抑制細(xì)胞活性及抗增殖效應(yīng),而對(duì)人臍靜脈
7、內(nèi)皮細(xì)胞無明顯影響。 (3)抗菌肽Cecropin B對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞生長(zhǎng)增殖抑制作用的機(jī)制至少部分依靠調(diào)節(jié)人膀胱癌T24細(xì)胞周期,促使人膀胱癌T24細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期;另外,抗菌肽Cecropin B能夠促使人膀胱癌T24細(xì)胞膜的裂解。 (4)抗菌肽Cecropin B對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞具有顯著的抑制作用,而對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞無明顯影響,與MMC聯(lián)合應(yīng)用顯示了很強(qiáng)的抗膀胱癌協(xié)同作用,這使其可能有望成為非肌
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