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1、本論文采用線粒體分子標(biāo)記(控制區(qū)和Cyt b基因)和核基因組分子標(biāo)記(微衛(wèi)星),分析了8個(gè)東方墨頭魚(yú)種群和12個(gè)紋唇魚(yú)種群的親緣地理關(guān)系及種群遺傳結(jié)構(gòu)。
主要結(jié)果如下:
1.基于線粒體分子標(biāo)記的東方墨頭魚(yú)與紋唇魚(yú)比較親緣地理研究
通過(guò)分析東方墨頭魚(yú)和紋唇魚(yú)線粒體控制區(qū)部分序列和Cytb基因全序列,研究?jī)晌锓N的種群遺傳變異及親緣地理格局。東方墨頭魚(yú)共分析7個(gè)河系8個(gè)種群共157個(gè)個(gè)體的線粒體序列1,887bp
2、,包括控制區(qū)5’端部分片段750bp和完整的Cyt b片段1,137bp;紋唇魚(yú)共分析10個(gè)河系12個(gè)種群共236個(gè)個(gè)體的線粒體序列1,888bp,包括控制區(qū)5’端部分片段751bp和完整的Cyt b片段1,137bp。結(jié)果為:
?。?)遺傳多樣性方面,在東方墨頭魚(yú)所分析的1887bp序列中,有110個(gè)變異位點(diǎn)(5.82%),包括60個(gè)簡(jiǎn)約信息位點(diǎn)(3.17%)和50個(gè)單變異位點(diǎn)(2.64%),110個(gè)變異位點(diǎn)共定義了88個(gè)單倍
3、型,各種群?jiǎn)伪缎投鄻有约昂塑账岫鄻有苑謩e為0.801-1.000(平均0.981)、0.00075-0.00468(平均0.00744);在紋唇魚(yú)所分析的1888bp序列中,有59個(gè)變異位點(diǎn)(3.12%),包括39個(gè)簡(jiǎn)約信息位點(diǎn)(2.06%)和20個(gè)單變異位點(diǎn)(1.05%),59個(gè)變異位點(diǎn)共定義了44個(gè)單倍型,各種群間單倍型多樣性及核苷酸多樣性分別為0.000-0.918(平均0.833)、0.000-0.00191(平均0.00233
4、)。
?。?)親緣地理關(guān)系上,東方墨頭魚(yú)個(gè)體NJ樹(shù)分為3支,海南島的昌化江種群?jiǎn)为?dú)聚為一支,紋唇魚(yú)個(gè)體NJ樹(shù)分為4支,昌化江種群的部分個(gè)體單獨(dú)聚為一支,均顯示出昌化江種群與其他種群親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。
?。?)種群分化及遺傳結(jié)構(gòu)方面,東方墨頭魚(yú)和紋唇魚(yú)的遺傳分化指數(shù)分別為0.649和0.428,均屬于高度分化。AMOVA分析和SAMOVA分析顯示兩物種均具有顯著的遺傳結(jié)構(gòu),瓊州海峽和五指山是東方墨頭魚(yú)的地理屏障,而紋唇魚(yú)的地理
5、屏障是云開(kāi)大山。
?。?)種群歷史動(dòng)態(tài)上,中性檢測(cè)與錯(cuò)配分析兩種檢測(cè)方法均顯示兩物種都經(jīng)歷過(guò)種群擴(kuò)張,繪制貝氏天際線點(diǎn)圖估算種群擴(kuò)張時(shí)間,顯示東方墨頭魚(yú)和紋唇魚(yú)發(fā)生種群擴(kuò)張的時(shí)間大約在1.8萬(wàn)年前和1.1萬(wàn)年前。
2.東方墨頭魚(yú)和紋唇魚(yú)微衛(wèi)星引物的篩選及種群遺傳結(jié)構(gòu)研究
?。?)用生物素-磁珠富集法篩選兩物種的微衛(wèi)星分子標(biāo)記。東方墨頭魚(yú)篩選出14對(duì)引物,用海南萬(wàn)泉河瓊海(QH)種群23個(gè)個(gè)體進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè);紋唇
6、魚(yú)篩選出13對(duì)引物,同樣用QH種群20個(gè)個(gè)體進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)。結(jié)果顯示:東方墨頭魚(yú),等位基因數(shù)目(NA)、多態(tài)信息含量(PIC)、觀測(cè)和期望雜合度(HO和HE)分別為8-25、0.6788-0.9342、0.5652-1.0000和0.7179-0.9585,有4個(gè)位點(diǎn)顯著偏離哈溫平衡(HWE),經(jīng)Bonferroni校正后各位點(diǎn)間未發(fā)現(xiàn)連鎖不平衡;紋唇魚(yú),NA、PIC、HO和HE分別為10-21、0.8020-0.9354、0.7500
7、-1.0000和0.8436-0.9628,偏離哈-溫平衡及連鎖不平衡現(xiàn)象均無(wú)發(fā)現(xiàn)。
?。?)各用13對(duì)引物對(duì)兩物種種群進(jìn)行遺傳多樣性及遺傳結(jié)構(gòu)分析,結(jié)果顯示:
?、龠z傳多樣性方面,東方墨頭魚(yú),種群中平均等位基因數(shù)為11.923,平均等位基因豐度為10.001,所有種群的期望及觀測(cè)雜合度分別是0.8581和0.8477;紋唇魚(yú),種群中平均等位基因數(shù)和平均等位基因豐度分別為12.090和14.385,所有種群的期望及觀測(cè)雜
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