母愛剝奪和慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠行為與海馬let-7a、mir-16表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究母愛剝奪和慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠行為與海馬let-7a、mir-16表達(dá)的影響；研究早期應(yīng)激對(duì)大鼠成年后再次經(jīng)歷慢性應(yīng)激的行為反應(yīng)及海馬let-7a、mir-16表達(dá)的影響。
　　 方法：將新出生的SD大鼠按窩別隨機(jī)分入母愛剝奪組(n=17)、慢性溫和應(yīng)激組(n=17)、雙重應(yīng)激組(n=17)和對(duì)照組(n=17)。母愛剝奪組大鼠在出生后接受母愛剝奪應(yīng)激。慢性溫和應(yīng)激組大鼠在成年后接受慢性溫和應(yīng)激。雙重應(yīng)激組大鼠出生后接受母

2、愛剝奪應(yīng)激，且在成年后接受慢性溫和應(yīng)激。對(duì)照組大鼠除日常清潔外，不接受任何實(shí)驗(yàn)性處理。所有大鼠在13周齡時(shí)接受行為評(píng)估，包括曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和糖水偏愛實(shí)驗(yàn)，分別評(píng)定大鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中爬行總路程、中央格比例、直立次數(shù)、大便顆數(shù)；在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中評(píng)定大鼠在水中的漂浮時(shí)間；在糖水偏愛實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)大鼠的糖水偏愛率。于行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死大鼠，采用實(shí)時(shí)定量熒光PCR技術(shù)檢測(cè)四組大鼠海馬中microRNA let-7a、mir-16的表達(dá)水平。采

3、用單因素方差分析和多因素方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：(1)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較：1)爬行總路程：母愛剝奪應(yīng)激和慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠爬行總路程的影響沒有主效應(yīng)(P>0.05)。而母愛剝奪應(yīng)激與慢性溫和應(yīng)激對(duì)爬行總路程的影響有交互作用；2)直立次數(shù)：母愛剝奪應(yīng)激對(duì)直立次數(shù)的影響沒有主效應(yīng)(P>0.05)。慢性溫和應(yīng)激對(duì)直立次數(shù)的影響具有主效應(yīng)。母愛剝奪應(yīng)激與慢性溫和應(yīng)激對(duì)直立次數(shù)的影響

4、具有交互作用(P<0.05)；3)中央格比例：母愛剝奪應(yīng)激、慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中中央格比例的影響沒有主效應(yīng)。母愛剝奪應(yīng)激與慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中中央格比例的影響不存在交互作用(P>0.05)；4)大便顆數(shù)：母愛剝奪應(yīng)激對(duì)大鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中大便顆數(shù)的影響沒有主效應(yīng)。母愛剝奪與慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中大便顆數(shù)的影響不存在交互作用(P>0.05)。而慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中大便顆數(shù)的影響具有主效應(yīng)(P<0.05)。

5、(2)強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較：母愛剝奪應(yīng)激對(duì)大鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中靜止漂浮時(shí)間的影響沒有主效應(yīng)(P>0.05)。而慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中靜止漂浮時(shí)間的影響具有主效應(yīng)(P<0.05)。母愛剝奪應(yīng)激與慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中靜止漂浮時(shí)間的影響具有交互作用(P<0.05)。(3)糖水偏愛實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較：母愛剝奪應(yīng)激和慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠在糖水偏愛實(shí)驗(yàn)中糖水偏愛率的影響均沒有主效應(yīng)(P>0.05)。而母愛剝奪應(yīng)激與慢性溫和應(yīng)激對(duì)大

6、鼠在糖水偏愛實(shí)驗(yàn)中糖水偏愛率的影響具有交互作用(P<0.05)。
　　 2.microRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果顯示：(1)let-7a檢測(cè)結(jié)果：母愛剝奪組、慢性溫和應(yīng)激組和雙重應(yīng)激組大鼠海馬let-7a相對(duì)表達(dá)量分別是對(duì)照組的26.21倍、1.12倍和44.62倍。母愛剝奪應(yīng)激、慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠海馬microRNA let-7a的表達(dá)水平的影響具有主效應(yīng)(P<0.05)，且母愛剝奪應(yīng)激與慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠海馬microRNAle

7、t-7a表達(dá)水平的影響具有交互作用(P<0.05)。(2)mir-16檢測(cè)結(jié)果：母愛剝奪組、慢性溫和應(yīng)激組和雙重應(yīng)激組大鼠海馬mir-16的相對(duì)表達(dá)量分別是對(duì)照組的5.66倍、1.35倍和8.92倍。母愛剝奪應(yīng)激對(duì)大鼠海馬mir-16表達(dá)水平的影響具有主效應(yīng)(P<0.05)。而慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠海馬mir-16表達(dá)水平的影響不存在主效應(yīng)，且母愛剝奪應(yīng)激與慢性溫和應(yīng)激對(duì)大鼠海馬mir-16表達(dá)水平的影響不存在交互作用(P>0.05)。

8、r>　　 結(jié)論：
　　 1.母愛剝奪應(yīng)激是大鼠在遭遇慢性溫和應(yīng)激后表現(xiàn)出抑郁樣反應(yīng)的易感因素，即與未經(jīng)歷過母愛剝奪應(yīng)激的大鼠相比，經(jīng)歷過母愛剝奪應(yīng)激的大鼠在其成年后經(jīng)歷慢性溫和應(yīng)激后表現(xiàn)出更明顯的抑郁樣行為。
　　 2.母愛剝奪應(yīng)激、慢性溫和應(yīng)激可使大鼠海馬microRNA let-7a的表達(dá)水平增加。母愛剝奪應(yīng)激可增加大鼠對(duì)慢性溫和應(yīng)激的反應(yīng)，即與未經(jīng)歷過母愛剝奪應(yīng)激的大鼠相比，經(jīng)歷過母愛剝奪應(yīng)激的大鼠在經(jīng)歷慢性溫和