擴張型心肌病患者循環(huán)中CD4+LAP+調(diào)節(jié)性T細胞缺陷.pdf

1、目的：探討擴張型心肌?。╠ilated cardiomyopathy,DCM）患者循環(huán)中CD4+LAP+（latency-associated peptide）Tregs（調(diào)節(jié)性T細胞）的數(shù)量和功能是否受損。
　　方法和結(jié)果：47例擴張型心肌病的患者（包括男性30名，女性17名，52±14歲）和57例正常對照者（包括男性30名，女性27名，47±10歲），獲取其外周血樣本，通過密度梯度離心法分離出外周血單個核細胞（peripher

2、al blood mononuclear cell，PBMC）用于流式細胞術(shù)分析、FACS（Fluorescence Activated Cell Sorter）分選、實時PCR和細胞培養(yǎng)。同時用電化學發(fā)光法測定血清NT-proBNP（N-terminal pro-Brain Natriuretic Peptide）水平。通過流式細胞術(shù)從PBMC中分選出CD4+LAP+Tregs細胞、Tresps（CD4+LAP-CD25int/low

3、 T細胞）和CD4+LAP-CD25highTregs細胞。與正常對照組（2.31±0.25，P＜0.01）相比，擴心病患者（1.37±0.16％）循環(huán)中CD4+LAP+Tregs在CD4+T細胞群體中所占的比例大大降低，且CD4+LAP+Tregs數(shù)量與左室射血分數(shù)（left ventricular ejection fraction，LVEF）成正相關(guān)，與左室舒張末期內(nèi)徑（leftventricularend diastolic d

4、iameter,LVEDD）和血清NT-proBNP成負相關(guān)。T細胞增殖和抑制實驗分為3個實驗組：1）5×104 Tresps單獨培養(yǎng)；2）5×104 CD4+LAP+Tregs和5×104 Tresps以不同比例共同培養(yǎng)（Treg：Tresp比例為1:1,1:2和1:4）；3）交叉實驗，來自擴心病患者的5×104 CD4+LAP+Tregs與對照組的5×104 Tresps共培養(yǎng)，來自對照組的5×104 CD4+LAP+Tregs與擴