新西蘭白兔自體Schwann細(xì)胞視網(wǎng)膜下移植的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分Schwann細(xì)胞體外純化培養(yǎng) 【目的】探索一種有效的Schwann細(xì)胞純化培養(yǎng)方法，為今后體外獲取高純度高活性的Schwann細(xì)胞視網(wǎng)膜下移植治療視網(wǎng)膜變性疾病奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 【方法】采用改進(jìn)的坐骨神經(jīng)組織塊反復(fù)種植方法分離純化Schwann細(xì)胞。相差顯微鏡形態(tài)學(xué)觀察、Schwann細(xì)胞膠質(zhì)特異性標(biāo)志蛋白S-100免疫細(xì)胞化學(xué)染色進(jìn)行細(xì)胞純度鑒定。 【結(jié)果】形態(tài)學(xué)連續(xù)觀察及S-100間接免疫熒光、免疫酶

2、染色顯示Schwann細(xì)胞的純度達(dá)95％。 【結(jié)論】本實(shí)驗(yàn)研究的Schwann細(xì)胞純化培養(yǎng)方法所獲細(xì)胞純度高、數(shù)量多，可用于視網(wǎng)膜變性疾病的治療研究。 第二部分自體Schwann細(xì)胞視網(wǎng)膜下移植 【目的】建立新西蘭白兔視網(wǎng)膜下移植的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，觀察自體Schwann細(xì)胞在視網(wǎng)膜下腔短期存活狀態(tài)。 【方法】Schwann細(xì)胞分別取自8只新西蘭白兔，純化培養(yǎng)后制成細(xì)胞懸液；采用外路法在8只右眼中進(jìn)行自體Schw

3、ann細(xì)胞視網(wǎng)膜下腔移植，左眼均為對(duì)照眼不施加任何干預(yù)因素；觀察隨訪6周即對(duì)術(shù)眼作組織病理學(xué)檢查。 【結(jié)果】自體成功移植4只兔眼，組織學(xué)檢查顯示Schwann細(xì)胞在視網(wǎng)膜下腔存活，未發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，移植區(qū)周圍視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)無(wú)明顯受損。 【結(jié)論】1．采用的外路法移植技術(shù)可將Schwann細(xì)胞成功植入視網(wǎng)膜下，術(shù)后并發(fā)癥較少。 2．移植的自體Schwann細(xì)胞可在視網(wǎng)膜下腔存活，且在移植區(qū)不引起明顯的炎癥反應(yīng)