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文檔簡介
1、目的:研究五眼果具有抗草酸鈣型尿石癥作用的活性部位及其作用機制。
方法:1、采用一維瓊脂凝膠雙向擴散法,顯微鏡下觀察草酸鈣晶體晶型的變化,研究瓊脂膠、氯化鈣、草酸鈉等濃度及培養(yǎng)溫度、時間對草酸鈣型結石的體外凝膠模擬體系的影響,優(yōu)化出最佳的熱力學(過飽和度)和動力學(成核、生長、聚集)等因素的條件,建立一維瓊脂凝膠體外草酸鈣結石模擬模型。2、采用一維瓊脂凝膠體外草酸鈣結石模擬模型,在顯微鏡下觀察草酸鈣晶體晶型的變化,研究基質(zhì)pH
2、值以及藥物作用時間、藥物加入?yún)^(qū)段及五眼果不同提取部位等因素對草酸鈣結晶晶型的影響,篩選出五眼果具有抗草酸鈣結石的活性部位。3、分別以不同誘石劑(誘石劑1:0.75%乙二醇和0.75%氯化銨混合溶液、誘石劑2:1.0%乙二醇和1.0%氯化銨混合溶液)構建小鼠腎草酸鈣結石模型,明確最佳誘石劑。4、采用誘石劑(0.75%乙二醇和0.75%氯化銨混合溶液)構建小鼠腎草酸鈣結石模型,造模時長4周,給予五眼果活性部位,通過測定尿草酸及Mg、Ca、P
3、、BuN、Cr含量以及末次收集尿液后取血,測血清 P、BuN、Cr含量;鏡下觀察腎小管中草酸鈣結晶分布和腎小管擴張的情況,檢測各組小鼠腎組織病理學改變和草酸鈣結晶沉積情況;并采用免疫組織化學檢測各組小鼠腎組織OPN蛋白的表達水平研究五眼果活性部位抗草酸鈣型尿石癥的作用及其作用機制。
結果:1.在1%瓊脂凝膠體系中,以[CaCl2]為0.1mol/L以及[Na2C2O4]為0.2mol/L,系統(tǒng)pH值為7.4,37℃下培養(yǎng)3天為
4、條件,可成功構建以形成COM為主的一維瓊脂凝膠體外草酸鈣型結石模擬模型;藥物加于2區(qū)能更好地抑制 COM的形成。2.五眼果水部位在體外能夠抑制形成穩(wěn)態(tài)的COM,使系統(tǒng)生成亞穩(wěn)態(tài)的COD;而乙酸乙酯、正丁醇部位則無抑制作用,形成穩(wěn)態(tài)的COM。3.五眼果水部位能降低尿草酸、Ca、BUN濃度(P<0.05),對尿P、Mg、Cr則無影響;減少草酸鈣結晶在腎臟的沉積,抑制OPN的表達。
結論:成功構建一維瓊脂凝膠體外草酸鈣結石模擬模型;
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