磺酸根離子化及白蛋白預吸附對膽管支架細菌吸附影響的體外研究.pdf

1、背景：
　　梗阻性黃疸是由膽結(jié)石或肝膽部位的腫瘤所造成的黃疸，在眾多的治療方法中，介入人工膽管支架是一種有效的治療方法;商業(yè)化聚氨基甲酸酯材質(zhì)的人工膽管也在臨床上應用，且此材質(zhì)在膽汁的測試中有不錯的成效，然而膽汁中生物膜的形成以及沉積物的附著導致人工膽管支架再阻塞，從而縮短了使用期限，因此，改變膽管支架材質(zhì)的表面性質(zhì)是防止再堵塞的有效方法。
　　目的：
　　通過對聚氨基甲酸酯作磺酸根離子基團的改質(zhì)，同時以白蛋白吸附進行

2、表面處理，探討對膽管支架表面細菌粘附、膽汁沉積物和膽管支架堵塞的影響。
　　方法：
　　1.將氫化鈉(NaH)加入PU溶液進行雙分子親核取代反應，之后再加上丙烷硫酸酯進行開環(huán)反應，最后產(chǎn)生不同磺酸根離子含量的PU，涂層于聚乙烯(PE)及氧化聚乙烯管(OxPE)。
　　2.選擇白蛋白濃度1mg/ml，預吸附時間10分鐘與60分鐘，將材質(zhì)為聚乙烯、氧化聚乙烯、磺酸化聚氨酯、基聚氨酯的支架經(jīng)紫外線照射，以串聯(lián)方式連接，兩端接

3、三通管，通入緩沖液并在管內(nèi)停留12小時以上。
　　3.針對不同磺酸根離子含量及蛋白質(zhì)吸附10分鐘及60分鐘的聚氨基甲酸酯，在濃度為4～9×107 CFU/mL DH5α型大腸桿菌的人體膽汁及PBS中做體外24小時連續(xù)循環(huán)實驗。
　　4.實驗經(jīng)24小時后，將支架以PBS潤洗，流體入口的前3厘米舍棄，之后每1厘米取樣一次，共取三次進行表面吸附細菌的定量，另外再取1厘米，使用含2.5％戊二醛的PBS溶液進行表面細菌的固定化6小時，

4、并進行干燥處理程序。接著材質(zhì)進行鍍金處理，以掃描式電子顯微鏡(SEM)進行表面細菌吸附情形的觀察。
　　結(jié)果：
　　1.SEM圖可觀察到在膽汁循環(huán)實驗方面，高磺酸根離子含量的PU能減少細菌及沉積物的吸附;在緩沖液循環(huán)實驗方面，沒有沉積物的生成，且表面吸附的細菌沒有聚集的現(xiàn)象，大多呈單層吸附，并平均分散在材質(zhì)的表面。在細菌吸附量分析方面，顯示隨著磺酸基含量的增加，表面細菌的吸附量逐漸減少。
　　2.材質(zhì)經(jīng)白蛋白的預吸附處

5、理后，在緩沖液系統(tǒng)下，發(fā)現(xiàn)經(jīng)白蛋白預吸附后的材質(zhì)表面有較少的細菌吸附，且隨白蛋白預吸附時間增加，細菌吸附量有減少的趨勢。
　　3.PE、OxPE、Pell-S-0.10經(jīng)白蛋白預吸附處理后，抑制細菌吸附的效果好;且在PE、OxPE中，白蛋白預吸附60分鐘比10分鐘其細菌吸附量更少，其差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，在Pell-S-0.10中，白蛋白預吸附60分鐘與10分鐘細菌吸附量無明顯差異。
　　結(jié)論：
　　本實