重樓皂苷I對高轉(zhuǎn)移人卵巢癌細(xì)胞體外生長抑制及抗轉(zhuǎn)移功能研究.pdf

1、重樓（Rhizoma Paridis）為百合科重樓或七葉一支花的根莖，具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚的功效?，F(xiàn)代藥理研究表明該藥具有止血、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、心血管作用等廣泛的藥理活性。許多學(xué)者在重樓的抗腫瘤研究中發(fā)現(xiàn)重樓皂苷和重樓提取物在體內(nèi)外實(shí)驗中顯示出明顯的抑瘤作用。
　　目的：研究重樓提取的活性成分重樓皂苷I對高轉(zhuǎn)移人卵巢癌細(xì)胞的體外生長抑制及抗轉(zhuǎn)移功能，并初步探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法：用 CCK8法檢測不同

2、濃度重樓皂苷 I在不同時間點(diǎn)對高轉(zhuǎn)移人卵巢癌細(xì)胞（HO-8910PM）體外增殖的影響；光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)的變化；用流式細(xì)胞術(shù)（FCM）檢測經(jīng)不同濃度重樓皂苷I處理后高轉(zhuǎn)移人卵巢癌細(xì)胞的細(xì)胞周期變化；用AnnexinV/PI雙染法、Hoechst33258檢測不同濃度重樓皂苷I誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生；選用Transwell小室侵襲實(shí)驗觀察不同濃度重樓皂苷 I對高轉(zhuǎn)移人卵巢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響；利用RT-PCR檢測與轉(zhuǎn)移相關(guān)基因MMP9、uPA

3、的表達(dá)。
　　結(jié)果：重樓皂苷I在0.5～5μg/ml濃度范圍對HO-8910PM細(xì)胞的增殖均有明顯抑制作用，并呈現(xiàn)明顯的劑量-時間依賴性。其半數(shù)抑制濃度在24小時到120小時范圍內(nèi)基本集中在1～3.5μg/ml之間；重樓皂苷I主要影響HO-8910PM細(xì)胞的DNA合成前期（G0/G1）；重樓皂苷I濃度控制在2μg/ml以內(nèi)，早期即3小時開始就能誘導(dǎo)HO-8910PM細(xì)胞的凋亡，作用時間越長，凋亡發(fā)生率越高；重樓皂苷I可以抑制HO-