東北梅花鹿性周期內(nèi)卵巢活動(dòng)規(guī)律的研究.pdf

1、為探討東北梅花鹿性周期內(nèi)卵巢活動(dòng)規(guī)律及生殖激素調(diào)控卵泡發(fā)育成熟和排卵的模式，以及為進(jìn)一步揭示母鹿繁殖機(jī)理提供理論依據(jù)實(shí)施了本試驗(yàn)。試驗(yàn)選擇4～5周歲、2～3產(chǎn)的健康東北梅花鹿共89只，其中16只選自繁殖(6～8月)和非繁殖(9～10月)季節(jié)，手術(shù)取出卵巢后采用MOTICSFC-18型光學(xué)顯微鏡和透射電子顯微鏡(JEM-1200E型，日本生產(chǎn)；TEICANA荷蘭生產(chǎn))進(jìn)行卵巢和卵泡的顯微和超顯微組織學(xué)研究;在繁殖季節(jié)共對(duì)69只鹿采用SN-

2、695B型智能放免γ測(cè)定儀測(cè)定血液中FSH、LH、E2和P4的含量，以研究生殖激素的變化規(guī)律；采用B-型超聲波診斷儀對(duì)在繁殖季節(jié)的4只鹿進(jìn)行卵巢形態(tài)和卵泡發(fā)育的超聲影像學(xué)研究。采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS11.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析；研究結(jié)果表明： 1.卵巢組織由生殖上皮、白膜、皮質(zhì)和髓質(zhì)構(gòu)成，生殖上皮為單層立方或柱狀，白膜由締組織構(gòu)成，皮質(zhì)部在卵巢的外周，間質(zhì)腺不發(fā)達(dá)。皮質(zhì)中分布著各級(jí)卵泡，有原始卵泡、初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡、三級(jí)

3、卵泡和成熟卵泡。上述各級(jí)卵泡中的卵母細(xì)胞和卵泡細(xì)胞直徑分別是：27.72±7.35μm和37.09±6.89μm，43.12±14.92μm和86.18±20.47μm，85.125±17.39μm和284.59±93.82μm，103.05±9.93μm和993.61±542.05μm，127.5±3.54μm和3500±2765.36μm。卵巢B-超影像學(xué)特征為：稍扁，多呈橢圓形，邊緣光滑清晰，界限明顯。在發(fā)情周期內(nèi)，有大小不一的發(fā)

4、育卵泡和黃體；卵泡顯示為無(wú)回聲的團(tuán)狀黑影：黃體為均勻的深灰色細(xì)小顆粒組成，退化后成為強(qiáng)反射。 2.卵泡在發(fā)育過(guò)程中，卵泡細(xì)胞形成的突起與卵母細(xì)胞始終保持密切的聯(lián)系；卵母細(xì)胞從原始卵泡到直徑1.5～3mm的三級(jí)卵泡，細(xì)胞質(zhì)中線粒體數(shù)量由少劍多，線粒體內(nèi)的嵴不斷增加，高爾基體由不典型到變成典型，皮質(zhì)顆粒由開(kāi)始形成到形成較多的皮質(zhì)顆粒，并逐漸地遷移到卵母細(xì)胞膜下。在發(fā)情周期中，卵巢上小卵泡、中等卵泡和大卵泡的比率分別為92.51％(9

5、2.51±5.87)、4.60％(4.60±4.91)和2.88％(2.88±2.22)，成熟卵泡的直徑平均為7.17(7.17±3.1)mm；小卵泡是卵泡發(fā)育的基礎(chǔ)，各類(lèi)卵泡在整個(gè)發(fā)情周期的數(shù)量和直徑均存在著動(dòng)態(tài)變化，有較穩(wěn)定的分布。 3.卵泡閉鎖發(fā)生于卵泡生長(zhǎng)的各個(gè)時(shí)期：原始卵泡和次級(jí)卵泡閉鎖較簡(jiǎn)單，為卵母細(xì)胞首先表現(xiàn)出退行性變化、皺縮；卵泡細(xì)胞核固縮、卵泡變形。三級(jí)卵泡的閉鎖分為早期、中期和后期三個(gè)時(shí)期。 4.透明

6、帶物質(zhì)出現(xiàn)于3～4層卵泡細(xì)胞包圍卵母細(xì)胞時(shí)，開(kāi)始出現(xiàn)短而粗的微絨毛；而當(dāng)卵泡細(xì)胞在4層以上時(shí)形成一層薄而完整的透明帶，同時(shí)微絨毛變得密集而細(xì)長(zhǎng)；到三級(jí)卵泡(1.5～3mm)時(shí)，微絨毛開(kāi)始縮短變粗，部分退出透明帶。 5，發(fā)情周期中，在排卵后第5d，卵巢上可見(jiàn)到黃體，平均直徑為4.5mm×7.5mm，排卵前第4～7d黃體發(fā)育到最大，平均為9.3mm×14mm，排卵前2～3d黃體直徑平均為4.0mm×6.0mm。 6.斷乳后2

7、～44d，血清中FSH、LH、E2和P4的平均含量分別為：2.01±0.08mIU/ml、4.66±0.17mIU/ml、4.47±1.11pg/ml和0.48±0.12ng/ml。其中，F(xiàn)SH在第8d出現(xiàn)峰值(2.73±0.14mIU/ml)；LH在第8d顯著升高達(dá)4.92±0.97mIU/ml，然后呈現(xiàn)一定的不規(guī)則波動(dòng)；E2在第5d出現(xiàn)峰值(34.55±15.25pg/ml)；Pd由第2d的0.67±0.05ng/ml，到第11d時(shí)

8、明顯的下降到0.45±0.06ng/ml(p＜0.05)，之后沒(méi)有明顯的變化(p＞0.05)。 7.發(fā)情前16d到發(fā)情后6d內(nèi)，血清中FSH、LH、E2和P4的平均含量分別為：2.62±0.08mIU/ml、6.46±0.23mIU/ml、3.38±0.24pg/ml和0.61±0.03ng/ml。其中，F(xiàn)SH從第16d到10d緩慢升高，到第10d達(dá)2.89±0.21mIU/ml(p＜0.05)，然后處于平穩(wěn)狀態(tài)，直到發(fā)情后的第

9、6d;LH從第12d開(kāi)始緩慢上升，到發(fā)情時(shí)達(dá)到峰值，發(fā)情后第2d又明顯下降，之后沒(méi)有明顯變化(p＞0.05)；E2在第8d和第2d分別出現(xiàn)一個(gè)峰值(p＜0.05或p＜0.01)，在發(fā)情當(dāng)天顯著下降(p＜0.01)，到發(fā)情后第2d下降到最低;P4從第16d緩慢上升，到第6d達(dá)峰值，在發(fā)情當(dāng)天降為最低，在發(fā)情后第2d顯著升高達(dá)0.84±0.16ng/ml(p＜0.05)，之后，保持平穩(wěn)。 8.在發(fā)情的24h內(nèi)，各時(shí)間上FSH、LH、

10、E2和P4含量沒(méi)有明顯變化(p＞0.05)，并且與發(fā)情當(dāng)天沒(méi)有顯著差異(p＞0.05)。平均分別為：2.41±0.10mIU/ml、4.70±0.51mIU/ml、1.12±0.16pg/ml和0.53±0.03ng/ml。 9.妊娠早期(2～38d)FSH、LH、E2和P4的平均含量分別為1.60±0.66ng/ml、3.272.99mIU/ml、6.47±4.28pg/m和0.05±0.04ng/ml;其中，F(xiàn)SH從妊娠開(kāi)始

11、穩(wěn)步上升，但在第4d和第14d出現(xiàn)兩個(gè)低峰，在第20d出現(xiàn)一個(gè)最低值(0.93±0.88mIU/ml)，然后迅速上升，達(dá)到最高值(2.14±0.50mIU/ml)后維持在較平穩(wěn)的水平上；LH從妊娠開(kāi)始呈現(xiàn)緩慢下降的趨勢(shì)，并一直處于低穩(wěn)的水平，LH各峰值之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；E2除在第8d出現(xiàn)一個(gè)較大的峰值外，一直都是穩(wěn)步降低：P4從妊娠開(kāi)始逐漸增加，至20d開(kāi)始下降，到第26d降到最低值，然后開(kāi)始迅速上升，在第34d出現(xiàn)一個(gè)

12、最高值(0.14±0.037ng/ml)后呈下降趨勢(shì)。 10.在麻醉、驅(qū)趕進(jìn)吊圈保定和多次驅(qū)趕進(jìn)吊圈保定三種不同刺激強(qiáng)度下，發(fā)情雌鹿血清中LH、P4、FSH和E2的濃度分別為3.06±0.21mIU/ml、6.57±0.25mIU/ml和8.83±1.90mIU/ml，0.42±0.12ng/ml、0.56±0.38ng/ml和0.54±0.15ng/ml，2.62±0.11mIU/ml、2.86±0.13mIU/ml和2.55