馬鈴薯G-type lectin絲-蘇氨酸蛋白激酶StBL-SLG-PK的功能鑒定.pdf

1、馬鈴薯作為世界第四大糧食作物，被廣泛的種植和食用。由致病疫霉引起的晚疫病是馬鈴薯最為嚴重的病害，嚴重威脅了馬鈴薯的生產(chǎn)。研究馬鈴薯晚疫病抗病機制對于馬鈴薯持久抗性育種具有重要的意義。本課題組前期克隆得到一個抗病相關基因StBL-SLG/PK，并獲得干涉和超量轉基因植株，晚疫病接種初步鑒定表明，StBL-SLG/PK參與馬鈴薯晚疫病抗性。本研究旨在對StBL-SLG/PK的功能進一步的研究，并探討該基因在晚疫病抗性中的可能作用機制。主要結

2、果如下:
　　1.對StBL-SLG/PK序列進行進一步的生物信息學分析，StBL-SLG/PK是一個典型的G-type lectin絲蘇氨酸蛋白激酶。在薯塊和匍匐莖中表達量較高。BABA誘導下表達量較高，對其他生物非生物脅迫并無明顯響應。
　　2.本氏煙草表皮亞細胞定位，發(fā)現(xiàn)StBL-SLG/PK定位于內質網(wǎng)上。
　　3.選取超量表達水平高和干涉效率較好的轉基因株系各5個進行接種鑒定，結果顯示超量株系抗性相比于對照并

3、無顯著性提高，干涉株系抗性相比于對照在一定程度上下降，部分株系與對照相比抗性顯著下降。
　　4.對StBL-SLG/PK馬鈴薯轉基因株系和本氏煙草VIGS瞬時沉默株系接種晚疫病菌后組化染色分析活性氧的生成情況，StBL-SLG/PK沉默株系中的活性氧積累量明顯低于對照，超量株系中活性氧積累量相比于對照并無顯著提高。本氏煙草中VIGS沉默株系中的活性氧的積累量與TRV:GFP株系相比并無明顯差異，但是有更多的超氧根陰離子積累以及更多

4、的菌絲生長。StBL-SLG/PK可能參與到植物基礎抗性中。
　　5.qRT-PCR在轉基因株系中分析抗性相關Marker基因表達量，接種晚疫病菌60 h時轉基因株系中StACRE31，StPTi5，StNADP-ME, StHMRG2的表達量相比于對照E3均下調表達，超量株系下調更為明顯。StWRKY8表達量在干涉株系中上調表達，而超量株系中下調表達。
　　6.對轉基因株系進行抗鹽性進行了初步分析，在150 mM NaCl