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文檔簡介
1、金線蓮[Anoectochilusroxburghii(Wall.)Lindl.]具有很高的藥用價(jià)值以及觀賞價(jià)值,但是隨著人工采挖和自然條件的惡化,其野生資源瀕于枯竭。為了更好地保護(hù)、開發(fā)和利用這一傳統(tǒng)珍稀藥材,本研究以金線蓮為材料,通過組織培養(yǎng)對金線蓮原球莖的分化條件、增殖條件、生根培養(yǎng)條件、移栽條件進(jìn)行了優(yōu)化。主要研究結(jié)果如下:
1.金線蓮原球莖增殖條件優(yōu)化
本實(shí)驗(yàn)采用L9(33)正交試驗(yàn),因素和水平分別為:培養(yǎng)
2、基(MS,1/2MS,B5),NAA(0.3mg·L-1,0.6mg·L-1,0.9mg·L-1)和BA(0.3mg·L-1,0.6mg·L-1,0.9mg·L-1),形成9種組不同培養(yǎng)基。將金線蓮蒴果外表滅菌,無菌取出種子,置萌發(fā)培養(yǎng)基(1/2MS+1.0g/LAC+30g/L蔗糖+6.0g/L瓊脂)上,在溫度24~28℃、光照強(qiáng)度1500~2000Lux、光照時(shí)間12h/d的條件下,25d后得到原球莖。然后將原球莖接入上述9種培養(yǎng)基
3、,培養(yǎng)42d。根據(jù)增殖系數(shù),確定增殖培養(yǎng)基為:1/2MS+0.6mg·L-1NAA+0.6mg·L-1BA。
2.金線蓮原球莖分化條件優(yōu)化
本實(shí)驗(yàn)采用L9(33)正交試驗(yàn),因素和水平分別為:培養(yǎng)基(MS,1/2MS,B5),NAA(1mg·L-1,2mg·L-1,3mg·L-1),BA(0.1mg·L-1,0.2mg·L-1,0.4mg·L-1),形成9中不同培養(yǎng)基組合。將培育的原球莖轉(zhuǎn)接入分化培養(yǎng)基,于24~28℃
4、、光照強(qiáng)度1500~2000Lux、光照時(shí)間12h/d條件下培養(yǎng)28d,原球莖分化形成帶葉的芽苗。通過比較分化率,確定優(yōu)化培養(yǎng)基為:1/2MS+2mg·L-1NAA+0.2mg·L-1BA。
3.金線蓮生根培養(yǎng)條件優(yōu)化
本實(shí)驗(yàn)采用L9(33)正交試驗(yàn),因素和水平分別為:培養(yǎng)基(MS、1/2MS、B5),NAA(0.3mg·L-1、0.6mg·L-1、0.9mg·L-1),營養(yǎng)物質(zhì)(10%馬鈴薯汁、10%香蕉汁、10%
5、椰汁)。根據(jù)生根率,確定生根培養(yǎng)基為:1/2MS+0.6mg·L-1NAA+10%香蕉汁。
4.金線蓮移栽條件優(yōu)化
本實(shí)驗(yàn)采用L9(33)正交試驗(yàn),因素和水平分別為:培養(yǎng)基質(zhì)(珍珠巖∶硅石∶園土=1∶1∶4、珍珠巖∶硅石∶園土=1∶1∶6、珍珠巖∶硅石∶園土=1∶1∶8),營養(yǎng)液(花寶1號)濃度(500倍液、1000倍液、1500倍液),煉苗時(shí)間(10d、20d、30d)。根據(jù)移栽成活率,確定金線蓮移栽條件為:珍珠巖
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