神經(jīng)遞質(zhì)和生物活性胺對(duì)MDCK單層模型上丙磺舒轉(zhuǎn)運(yùn)的影響.pdf

1、藥物從給藥部位進(jìn)入機(jī)體,要跨過(guò)細(xì)胞膜屏障轉(zhuǎn)運(yùn)、代謝及排泄作用,才能在起效部位達(dá)到較為穩(wěn)定的濃度產(chǎn)生作用。腎臟作為機(jī)體重要的清除器官,能將外源和內(nèi)源途徑吸收、產(chǎn)生的化學(xué)物質(zhì)及其代謝物排至體外。腎小管重吸收和分泌過(guò)程有轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)。MDCK細(xì)胞來(lái)源于犬腎遠(yuǎn)曲小管,是研究腎遠(yuǎn)端小管排泄功能的理想工具。
　　 本文目的：
　　 利用MDCK細(xì)胞單層模型,以有機(jī)酸類藥丙磺舒(Probenecid,PBD)為模型藥,研究神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)腎

2、遠(yuǎn)曲小管細(xì)胞模型上藥物轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)節(jié)。
　　 本文采用下述方法研究：
　　 (1)建立MDCK細(xì)胞單層模型,考查PBD在該模型上的轉(zhuǎn)運(yùn)情況,探討其跨細(xì)胞吸收與分泌方式;
　　 (2)探索神經(jīng)遞質(zhì)和生物活性胺對(duì)PBD在MDCK細(xì)胞單層模型上的轉(zhuǎn)運(yùn)的影響,分析其機(jī)制。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 (1)MDCK細(xì)胞模型上PBD的表觀通透系數(shù)(Papp)均大于1×10-5cm/s,且分泌組的Papp顯著高于吸收

3、組Papp,說(shuō)明在MDCK細(xì)胞模型上有較強(qiáng)的分泌能力,證明有機(jī)酸類藥物在腎遠(yuǎn)端小管既有分泌也有重吸收,分泌能力大于吸收,其結(jié)果是PBD的凈分泌;
　　 (2)腎上腺素抑制PBD在腎遠(yuǎn)曲小管上的重吸收和分泌,但抑制程度不同,但去甲腎上腺素和異丙腎上腺素對(duì)PBD的轉(zhuǎn)運(yùn)基本無(wú)影響,其原因尚難以解釋;
　　 (3)5.羥色胺、多巴胺對(duì)PBD的分泌有明顯抑制作用,而對(duì)吸收無(wú)顯著性影響,提示PBD分泌和吸收轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程并非由同一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋

4、白介導(dǎo);
　　 (4)同側(cè)給予多巴胺受體阻滯劑氟哌啶醇,對(duì)多巴胺預(yù)處理過(guò)的MDCK上PBD的分泌具有明顯的抑制作用,根據(jù)介導(dǎo)有機(jī)陰離子分泌的OATs主要為OATl和OAT3以及PBD為OAT3競(jìng)爭(zhēng)性底物,明確多巴胺對(duì)OAT3的抑制作用;
　　 (5)使用腎上腺素、5.羥色胺、多巴胺調(diào)節(jié)MDCK細(xì)胞蛋白磷酸酶活性后顯著的減少:PBD的累積分泌,說(shuō)明ONI、會(huì)受到蛋白磷酸化的調(diào)節(jié)。
　　 得到下述結(jié)論：