小檗胺與紫杉醇納米微球的構(gòu)建及其體外協(xié)同抑瘤效應(yīng)評(píng)價(jià).pdf

1、目的：探討小檗胺（Berbamine，BA）與常用化療藥物紫杉醇（Paclitaxel，PTX）聯(lián)合給藥對(duì)于人胃癌細(xì)胞株的影響；并且采用自行合成的聚己內(nèi)酯-聚乙二醇（methoxy poly（ethylene-glycol）-polycaprolactone，mPEG-PCL）二親嵌段共聚物，通過(guò)納米沉淀法，分別制備小檗胺載藥納米微球及小檗胺與紫杉醇雙藥載藥納米微球；通過(guò)考察其各項(xiàng)理化表征、釋放性質(zhì)以及體外協(xié)同抗腫瘤活性來(lái)明確載藥納米微

2、球在腫瘤治療中的優(yōu)勢(shì)，為這種新型的控釋納米給藥系統(tǒng)的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供科學(xué)根據(jù)。 方法：應(yīng)用中效原理（Median-effect Principle，Chou-Talalay聯(lián)合指數(shù)法）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，繪制小檗胺與紫杉醇單藥及聯(lián)合用藥對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的劑量-效應(yīng)曲線，確定聯(lián)合用藥時(shí)對(duì)腫瘤細(xì)胞的效應(yīng)（Fa）與合用指數(shù)（CI）的關(guān)系，判定藥物間的相互作用。通過(guò)開(kāi)環(huán)聚合法，制備mPEG-PCL二親嵌段共聚物，采用優(yōu)化的o/w乳化擴(kuò)散/揮發(fā)法，

3、制備負(fù)載小檗胺的納米粒子；優(yōu)化制備工藝并考察載體的結(jié)構(gòu)、分子量、納米粒子的形態(tài)、粒徑分布、體外釋藥特性等性質(zhì)。以MTT法，評(píng)價(jià)載藥納米微球在體外對(duì)于胃癌細(xì)胞株MKN-28、BGC-823的協(xié)同抗腫瘤活性。 結(jié)果：第一，在一定的濃度范圍內(nèi)小檗胺單藥與紫杉醇單藥對(duì)BGC-823與MKN-28細(xì)胞均顯示出了明顯的生長(zhǎng)抑制效果。當(dāng)將各個(gè)對(duì)應(yīng)濃度的兩藥聯(lián)合作用于胃癌細(xì)胞株時(shí)生長(zhǎng)抑制效果進(jìn)一步提高，低濃度的小檗胺與紫杉醇的協(xié)同殺傷效果明顯強(qiáng)

4、于高濃度下的兩藥協(xié)同效果。第二，所制備的小檗胺和紫杉醇的單藥及雙藥載藥納米粒子呈規(guī)整的球形，粒徑小于100nm，小檗胺最高載藥量為15.28％，包封率為87±3.4％。體外釋放實(shí)驗(yàn)顯示，載藥粒子具有緩釋特征。熒光標(biāo)記粒子的細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)證實(shí)，微球可通過(guò)胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)釋放藥物，這是微球不同于裸藥的抗腫瘤機(jī)制。小檗胺載藥納米微球與裸藥小檗胺對(duì)于腫瘤細(xì)胞的殺傷作用相差不大，且都具有濃度以及時(shí)間依賴性。第三，小檗胺與紫杉醇雙藥載藥微球

5、的粒徑小于100nm。雙藥微球中紫杉醇的載藥量為16.9±2.1％，包封率為16.9±2.1％：而雙藥微球中小檗胺的載藥量與紫杉醇接近，為14.8±1.9％，包封率達(dá)到了84.7±7.4％。體外釋放曲線顯示雙藥微球表現(xiàn)為一個(gè)緩慢釋放的特點(diǎn)。由細(xì)胞生存率曲線可以見(jiàn)到在BGC-823細(xì)胞系上，雙藥載藥微球所造成的細(xì)胞殺傷明顯強(qiáng)于同樣濃度的紫杉醇單藥，顯示了小檗胺與紫杉醇被載入高分子微球后仍然具有良好的協(xié)同生長(zhǎng)抑制效果。 結(jié)論：小檗胺