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文檔簡介
1、大腸桿菌引起的仔兔腹瀉是嚴重威脅仔兔健康的重要傳染性疾病之一,一旦爆發(fā)便會造成重大傷亡,就會給養(yǎng)殖者造成嚴重的經(jīng)濟損失,嚴重制約養(yǎng)兔業(yè)的發(fā)展水平。近些年對仔兔大腸桿菌病的研究越來越透徹,但在發(fā)病時機體在通過TLR4/NF-κB啟動天然免疫程序并促進獲得性免疫反應(yīng)的發(fā)生過程中,TLR4、NF-κB的表達分布情況以及仔兔在發(fā)病階段腸道內(nèi)氧化還原系統(tǒng)的變化情況卻鮮有報道,而了解仔兔在發(fā)生大腸桿菌病時腸道TLR4/NF-κB信號通路的表達以及氧
2、自由基表達情況,對于全面了解仔兔大腸桿菌病的發(fā)生機制具有重要作用和意義。為探討仔兔感染大腸桿菌后腸道內(nèi)Toll樣受體4(TLR4)及NF-κB的表達以及氧化還原狀態(tài)的變化,將32只30-40日齡健康新西蘭仔兔隨機分為2組,分別為大腸桿菌感染組和正常對照組。仔兔在預(yù)飼七天,飲食,排便正常的情況下,人工攻毒大腸桿菌,正常對照組腹腔注射2mL無菌生理鹽水,大腸桿菌感染組腹腔注射大腸桿菌培養(yǎng)液2mL,成功造模后于攻毒后的1、3、5、7d采集腸道
3、組織,免疫組化法檢測腸道內(nèi)TLR4、NF-κB表達以及分光光度法測定腸道黏膜中總蛋白、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。
結(jié)果顯示與正常對照組相比,在感染后1d,大腸桿菌感染可顯著降低空腸SOD活性(P<0.05),有降低十二指腸和回腸SOD活性的趨勢;在感染后3d,感染可顯著降低十二指腸SOD活性(P<0.05),有升高空腸SOD活性的趨勢;感染后5d,大腸桿菌感染可顯著降低十二指腸和空腸SOD活性(P<0.05)
4、,有降低回腸SOD活性的趨勢;感染后7d,大腸桿菌感染可顯著降低回腸SOD活性(P<0.05),有降低十二指腸和空腸SOD活性的趨勢。
與正常對照組相比,感染后第1d,大腸桿菌感染可顯著提高十二指腸和空腸的MDA含量(P<0.05);感染后第3d,大腸桿菌感染可顯著提高十二指腸MDA含量(P<0.05),有提高空腸和回腸MDA含量的趨勢;感染后第5d,大腸桿菌感染可顯著提高各段腸管MDA含量(P<0.05);感染后第7d,對各
5、段腸管MDA含量均無顯著變化(P>0.05)。
免疫組化法檢測十二指腸和空腸內(nèi)的TLR4的表達,結(jié)果顯示在仔兔感染大腸桿菌后的第3、7d,感染組TLR4陽性率顯著高于正常組(P<0.05),第5d大腸桿菌感染組TLR4陽性率極顯著高于正常對照組(P<0.01);免疫組化法檢測十二指腸和空腸NF-κd3的表達,結(jié)果發(fā)現(xiàn)仔兔感染大腸桿菌后的第3d,感染組NF-κB陽性率顯著高于正常對照組(P<0.05),第5d感染組NF-κd3陽
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