甘肅河西走廊地區(qū)錦雞兒的SSR分析.pdf

1、錦雞兒是豆科錦雞兒屬多年生灌木植物，具有很高的飼用和藥用等價值，是防風(fēng)固沙的先鋒植物。本研究結(jié)合具體的研究條件，采用SSR分子標(biāo)記技術(shù)對來自甘肅河西走廊地區(qū)的14種錦雞兒進(jìn)行遺傳多樣性分析和聚類比較，旨在錦雞兒的遺傳育種研究提供必要的依據(jù)。研究結(jié)果如下： 　　1.在利用SSR技術(shù)研究錦雞兒遺傳多樣性過程中，從引物篩選、擴(kuò)增條件、檢測方法等幾個方面進(jìn)行優(yōu)化，建立錦雞兒SSR最適合的反應(yīng)體系為：10μL的PCR反應(yīng)體系：模板DNA2

2、0ng/μL,引物濃度為1.5μmol/L，dNTP濃度為0.20mmol/L，Mg2+濃度為2.0mmol/L，TaqDNA聚合酶為1U。SSR的PCR擴(kuò)增條件為：95℃預(yù)變性3 min，94℃變性30 s，53℃退火1min，72℃延伸1min，共30個循環(huán)，72℃延伸10min。cpSSR的PCR擴(kuò)增條件為：94℃預(yù)變性3 min，94℃變性30 s，54℃退火11Os，72℃延伸1min，共30個循環(huán)，72℃延伸8min。在此優(yōu)

3、化體系下，可以得到重復(fù)性好、穩(wěn)定且多態(tài)性高的SSR條帶。 　　2.從66對SSR大豆引物中篩選出9對多態(tài)性SSR引物，引物多態(tài)率為13.64％。從40對葉綠體SSR(epSSR)大豆引物篩選出10對cpSSR多態(tài)性引物，引物多態(tài)率為25％。9對SSR引物共檢測到109個等位變異，平均每個引物檢測到11個等位變異。引物等位位點多態(tài)性信息量PIC變幅在0.320～0.921之間，平均為0.738。Shannon指數(shù)變幅在0.246～

4、0.486之間，平均為0.342。10對葉綠體SSR共檢測到92個等位變異，平均每個引物檢測到9個等位變異。引物等位位點多態(tài)性信息量PIC變幅在0.512～0.865之間，平均為0.671。Shannon指數(shù)變幅在0.308～0.500之間，平均為0.444。 　　3.14種錦雞兒間的Nel’s遺傳相似系數(shù)(Gs)在0.60～0.92之間，平均GS為0.76。14種錦雞兒的遺傳相似性變幅大，種闖的遺傳相似性依物種的變化而各異，存