蘭考906抗白粉病新基因的分子標記篩選.pdf

1、小麥蘭考906系列品系是我省培育的抗白粉病新種質(zhì)。遺傳分析表明，蘭考906攜帶1個小種?；碾[性抗白粉病新基因，暫標記為PmLK906。為了深入研究和有效利用蘭考906的抗白粉病基因，用SSR分子標記技術和基因芯片技術篩選了與PmLK906緊密連鎖的分子標記。通過中國春缺體.四體系和缺失系將該基因定位在了小麥染色體2AL上.研究結果可直接用于分子標記輔助育種，并為通過圖位克隆技術克隆抗病基因.PmLK906奠定了基礎。本研究的具體研究內(nèi)

2、容及結果如下： 1.以感病品種中國春、豫麥21、濮9等為母本，以蘭考906為父本配制了抗、感雜交組合.用離體葉段培養(yǎng)法對F1、F2代分離群體、F2:3家系分離群體進行了苗期抗病性鑒定，結果表明蘭考906品系攜帶1對小種?；碾[性抗白粉病基因. 2.以中國春/蘭考906雜交F2:3家系為材料，用“集團分離分析法(BSA)”建立抗病池和感病池，篩選與抗病基因連鎖的SSR標記。共篩選了150對SSR引物，其中2對引物gwm26

3、5和gdm93在抗、感親本和抗、感DNA池之間具有穩(wěn)定的多態(tài)性。 3.將2對引物在由129個家系組成的中國春/蘭考906雜交F2:3家系分離群體中進行連鎖分析驗證，結果表明gwm265和gdm93的擴增產(chǎn)物與PmLK906基因連鎖，遺傳距離分別為3.72和6.15 cM，該標記被記為Xgwm265和Xgdm93。 4.利用中國春缺體-四體系和缺失系將標記Xgwm265定位在了小麥染色體2AL，上，從而將PmLK906定位

4、于2AL上。 5.以中國春/蘭考906雜交F2:3家系為材料，用BSA法建立抗病和感病cDNA池。以抗、感cDNA池為探針篩選小麥基因芯片(Affymetrix產(chǎn)品)，獲得了與PmZX906相關的ESTs。在此基礎上克隆了一個與粗山羊草csAtPR5類似的基因，命名為TaAetPR5。 6.在中國春/蘭考906雜交F2:3家系分離群體中進行連鎖分析驗證，結果表明TaAetPP5基因與PmLK906基因連鎖，遺傳距離7.6