shRNA下調abcb1基因逆轉卵巢癌細胞多藥耐藥性的研究.pdf

1、東南大學碩士學位論文shRNA下調abcb1基因逆轉卵巢癌細胞多藥耐藥性的研究姓名：張洪義申請學位級別：碩士專業(yè)：基礎醫(yī)學；病原生物學指導教師：竇駿20110603東南人學塒!l學位論文結果1RTPCR從A2780細胞巾成功擴增出口6c6J『基因：2瓊脂糖凝膠電泳顯示成功構建三個干擾質卡矗pSUPEREGFPlMDRl，shRNAs及陰性對照質粒pSUPEREGFPlscrambleshRNA；3成功轉染并篩選出單克降細胞株A2780p

2、lasmid、A2780scramble—shRNA、A2780MDR1shRNAl、A2780MDR1shRNA2、A2780MDR1shRNA3。4q—PCR和westemblot結果娃示A2780一MDR1shRNA2、A2780MDR1shRNA3中MDR1蛋白的表達受劍抑制5MTT檢測細胞的耐藥申牛漫示：轉染了干擾質粒的單克隆細胞株A2780MDRlshRNA2對化療敏感性增強。6平板克降形成實驗表明：各細胞株之問的克降形成能

3、力沒有顯著差異。7A2780MDRlshRNA2克隆細胞株在裸鼠皮下形成的腫瘤對紫杉醇化療較其他各組更為敏感。結論：靶向口6c6J的干擾質粒psuPEREGFPl一MDRlshRNA2可以下調MDR—l的表達。降低A2780細胞對長春新堿、紫杉醇耐藥性，但不影響腫瘤細胞的克降形成能力。本研究提示：shRNA下調以6c6，基因可減低MDRl表達，部分地逆轉A2780細胞多藥耐藥性，增強卵巢癌患者對化療的敏感性，提高治愈率?！P鍵字口6c6