拳參抗?jié)冃越Y(jié)腸炎有效部位制備工藝及其質(zhì)量控制方法的研究.pdf

1、本研究以蒙醫(yī)常用藥拳參為研究對(duì)象，觀察拳參不同洗脫部位對(duì)TNBS誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸損傷的影響，篩選出拳參抗?jié)冃越Y(jié)腸炎的有效部位。建立了拳參抗?jié)冃越Y(jié)腸炎有效部位的制備工藝，并對(duì)其進(jìn)行了質(zhì)量控制方法研究。
　　 1.通過文獻(xiàn)檢索，對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的治療現(xiàn)狀及拳參的化學(xué)成分、藥理作用和臨床應(yīng)用進(jìn)行了綜述。
　　 2.以昆明種小鼠為受試對(duì)象，利用TNBS誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，對(duì)拳參不同的洗脫部位進(jìn)行抗?jié)冃越Y(jié)腸炎篩選，通過對(duì)正常

2、對(duì)照組、模型組對(duì)照組、陽性(柳氮磺胺吡啶，SASP)對(duì)照組、80％乙醇提取物組、30％乙醇洗脫物組、60％乙醇洗脫物組、90％乙醇洗脫物組進(jìn)行比較，以小鼠腹瀉、便血、體重變化、腸重指數(shù)、組織病理學(xué)的改變等為評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定60％乙醇洗脫部位為抗?jié)冃越Y(jié)腸炎有效部位。
　　 3.建立了拳參有效部位的制備方法。首先經(jīng)正交實(shí)驗(yàn)考察優(yōu)化了拳參有效部位的提取工藝，以總黃烷及綠原酸含量為指標(biāo)，確定最佳提取工藝：80％乙醇浸漬48小時(shí)后，用8倍

3、量80％乙醇以7 mL/min進(jìn)行滲漉。然后利用大孔樹脂進(jìn)行純化，以總黃烷及綠原酸含量為指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)考察，結(jié)果A型大孔樹脂對(duì)有效部位中總黃烷及綠原酸富集率高，確定：洗脫溶劑為60％乙醇，上樣液pH3，上樣液濃度為0.3生藥g/mL，樹脂柱徑高比為1：7，吸附流速為2 BV/h，洗脫流速為2 BV/h，洗脫體積為3 BV。
　　 4.建立了有效部位的質(zhì)量控制方法。利用TLC及HPLC指紋圖譜對(duì)拳參有效部位進(jìn)行定性分析。采用香草醛-

4、鹽酸比色法對(duì)拳參有效部位中總黃烷進(jìn)行了含量測(cè)定，以兒茶素為對(duì)照品，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明兒茶素在0.4～2.4 mg之間時(shí)線性關(guān)系良好，回歸方程為：y=0.2570x-0.002，r2=0.9996(n=5)。精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果也均符合要求，測(cè)定有效部位總黃烷平均含量為62.6％，RSD為2.0％。采用HPLC法對(duì)拳參有效部位中綠原酸進(jìn)行了含量測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明綠原酸在0.408～4.08μg范圍時(shí)線性關(guān)系良好，y=5.6975×10