無精子因子及熱休克因子在無、少精癥患者精液、睪丸組織中的缺失研究.pdf

1、目的：通過檢測無、少精癥不育患者睪丸、精液基因組Y染色體上DAZ基因及熱休克轉錄因子(HSFY)缺失情況，探討不育癥病因的基因診斷方法。 方法 選擇35例特發(fā)性無、少精癥患者作為研究對象，其中少精癥18例、嚴重少精癥12例、無精癥5例；10例正常已生育健康男性的睪丸組織作為正常對照。應用PCR技術，檢測睪丸、精液基因組中的Y染色體上特異性序列標簽位點(STS)的引物擴增了解基因缺失情況。 結果 實驗組35

2、例標本及對照組10例睪丸組織標本中均能擴增出Y染色體短臂上的性別決定基因(SY14)，說明提取的基因組DNA模板符合實驗的要求．SY14基因擴增的片段長度為472bp，將SY14基因做為陽性對照。10例對照組的睪丸組織中均能擴增出SY14(SRY)、AZFb/HSFY、AZFc/SY254、AZFc/DAZ-1、AZFc/DAZ-2擴增條帶，說明無基因的微缺失。35例不育組中無精子癥3例：嚴重少精子癥2例(其中一例嚴重少精子癥和一例無精

3、癥患者為回族)可見SY14(SRY)擴增帶，但未見AZFc/SY254 (DAZ)、DAZ-1、DAZ-2擴增帶，表明有AZFc/SY254(DAZ)微缺失，其中2例同時未見AZFb/HSFY擴增帶，表明同時有AZFb/HSFY微缺失；1 例僅有AZFb/HSFY微缺失。為排除假陽性反應，對這5例標本進行3次PCR重復檢測，上述缺失仍無擴增信號，而SY14 (SRY)均能正常擴增，證實AZFb/HFY和AZFc/SY254(DAZ)微缺