寧心寶膠囊質(zhì)量評價方法研究.pdf

1、寧心寶膠囊為新鮮冬蟲夏草中分離得到的麥角菌科真菌蟲草頭孢(Cephalospovium sinensischen．Sp.nov)，經(jīng)液體深層發(fā)酵所得菌絲體的干燥粉末制成的膠囊。具有提高竇性心率，改善竇房結(jié)、房室傳導(dǎo)功能，改善心臟功能的作用。用于多種心律失常，房室傳導(dǎo)阻滯，難治性緩慢型心律失常傳導(dǎo)阻滯?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了甾體化合物和氨基酸兩項(xiàng)定性鑒別，并以每粒含氮(N)量作為定量指標(biāo)。隨著大量蟲草菌絲體發(fā)酵產(chǎn)品被開發(fā)，人工蟲草產(chǎn)品中化學(xué)成分的

2、整體含量和水平接近于蟲草子實(shí)體。到目前為止，對寧心寶膠囊的報道多集中在藥理方面，有關(guān)其化學(xué)成分的分析報道較少。為了準(zhǔn)確反映產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量，有必要對寧心寶膠囊的化學(xué)組成進(jìn)行研究。本文從3類化學(xué)成分入手，對不同廠家的寧心寶膠囊樣品進(jìn)行了質(zhì)量評價方法研究。 對4個不同廠家寧心寶膠囊中的水解氨基酸包括門冬氨酸、谷氨酸、絲氨酸、甘氨酸、組氨酸、精氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸進(jìn)行了

3、含量測定。采用柱前衍生異硫氰酸苯酯法測定其中水解氨基酸的含量，色譜柱為KromasilC18(250mm×4.6mmi．D．，5μm)，流動相為A：0.1mol/L乙酸鈉-乙腈(97：3，v/v)，B：乙腈-水(4：1，v/v)，梯度洗脫，流速1.0mL/min，檢測波長254nm，在40min內(nèi)，測定其中水解氨基酸的組成與含量。16種氨基酸線性范圍分別為0.016～0.201mgml/L(r=0.9974)，0.016～0.200mg

4、ml/L(r=0.9985)，0.016～0.201mgml/L(r=0.9993)，0.016～0.202mgml/L(r=0.9999)，0.016～0.199mgml/L(r=0.9996)，0.016～0.201mgml/L(r=0.9995)，0.016～0.202mgml/L(r=0.9994)，0.016～0.199mgml/L(r=0.9997)，0.016～0.198mgml/L(r=0.9999)，0.016～0.2

5、00mgml/L(r=0.9999)，0.016～0.201mgml/L(r=0.9998)，0.017～0.201mgml/L(r=0.9998)，0.016～0.202mgml/L(r=0.9999)，0.016～0.199mgml/L(r=0.9999)，0.016～0.202mgml/L(r=0.9999)，0.016～0.160mgml/L(r=0.9992)；回收率為91.5％～102.8％；RSD為0.7％～3.1％(n=

6、6)。 建立了高效液相色譜法測定寧心寶膠囊中核苷類成分的含量。色譜柱為AgilentTC-C18(250mm×4.6mmi．D．，5μm)；以磷酸鹽緩沖液(pH7.8～8.0)-乙腈(83：17)為流動相，流速為1.0mL/min；檢測波長為260nm。寧心寶膠囊中主要成分尿苷、腺苷和次黃嘌呤核苷分別在4.168～83.36μgml/L(r=0.9999)，4.480～89.60μgml/L(r=0.9999)和5.230～10

7、4.6μgml/L(r=0.9999)范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，平均加樣回收率分別為99.6％，102.1％和111.7％，RSD分別為0.4％，1.8％和2.5％。 建立了寧心寶膠囊多糖組分的相對分子質(zhì)量和相對分子質(zhì)量分布測定方法。以ShodexSB-803HQ，SB-804HQ和SB-805HQ(8.0mm×300mm，5μm)3根凝膠色譜柱串聯(lián)分離，以磷酸鹽緩沖液(pH7.8～8.0)為流動相，流速為0.8mL/min，柱溫