趨化因子在急性胰腺炎發(fā)病機(jī)制中作用及NAC干預(yù)的實(shí)驗研究.pdf

1、本文分三部分論述了趨化因子在急性胰腺炎發(fā)病機(jī)制中作用及NAC干預(yù)的實(shí)驗研究。 第一部分趨化因子MCP．1和MIP-2在實(shí)驗性急性胰腺炎發(fā)病機(jī)制中的作用。 目的：探討趨化因子單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)與巨噬細(xì)胞炎性蛋白-2(MIP-2)在急性壞死性胰腺炎大鼠早期發(fā)病機(jī)制中的作用，并觀察N-乙酰半胱氨酸(NAC)對趨化因子表達(dá)的影響。方法35只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(SO)組、急性壞死性胰腺炎(ANP)3h、6h、

2、12h組和NAC干預(yù)3h、6h、12h組。采用4％?；悄懰徕c胰膽管逆行注射制備ANP動物模型，NAC組在誘導(dǎo)ANP前0．5h給予腹腔注射NAC500mg／kg。檢測血淀粉酶、胰腺脂質(zhì)過氧化物(MDA)、髓過氧化物酶(MPO)，觀察胰腺病理組織學(xué)改變，采用逆轉(zhuǎn)錄．聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測胰腺組織中MCP-1與MIP-2mRNA的表達(dá)，同時經(jīng)免疫組化檢測胰腺NF-кB與MIP-2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：假手術(shù)(SO)組胰腺M(fèi)CP

3、-1mRNA與MIP-2mRNA表達(dá)陰性或弱表達(dá)，ANP各組均有MCP．1mRNA與MIP-2mRNA表達(dá)，并隨ANP病變的加重表達(dá)逐漸增強(qiáng)，浸潤到胰腺組織的白細(xì)胞明顯增多，白細(xì)胞有NFкB陽性表達(dá)，單核巨噬細(xì)胞有MIP-2陽性蛋白表達(dá)。MCP-1與MIP-2mRNA的表達(dá)與胰腺的病理損傷成正相關(guān)。經(jīng)NAC干預(yù)后，丙二醛(MDA)生成減少，NF-кB活性下降，趨化因子的表達(dá)下調(diào)，白細(xì)胞浸潤減少，組織損傷得到改善(P<0．05或0．01)

4、。結(jié)論在ANP早期，存在NF-кB的活化和趨化因子的過表達(dá)，并參與白細(xì)胞的趨化作用。NAC除抗氧化作用外，可能通過抑制NF-кB的活化減少了趨化因子的轉(zhuǎn)錄與分泌，使胰腺損傷得到改善。 第二部分趨化因子MCP-1和MIP-2在AP相關(guān)性肺損傷中的作用。 目的：探討趨化因子MCP-1與MIP-2在AP相關(guān)性肺損傷中的作用，觀察NAC對其表達(dá)的影響。方法35只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(S0)組、急性壞死性胰腺炎(ANP)3h、

5、6h、12h組和NAC干預(yù)3h、6h、12h組。采用4％?；悄懰徕c胰膽管逆行注射制備ANP動物模型，NAC組在誘導(dǎo)ANP前0．5h給予腹腔注射NAC500mg／kg。檢測血淀粉酶、肺泡灌洗液／血清伊文氏蘭比值、髓過氧化酶(MPO)，觀察肺病理組織學(xué)改變，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測肺組織中MCP-1與MIP-2mRNA的表達(dá)，同時經(jīng)免疫組化檢測肺NF-кB、MCP-1與MIP-2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：假手術(shù)(S0)

6、組肺組織MCP-1mRNA、MIP-2mRNA表達(dá)陰性或弱表達(dá)，ANP各組肺組織中均有MCP-1mRNA與MIP-2mRNA表達(dá)上調(diào)，并隨ANP病變的加重表達(dá)逐漸增強(qiáng)。肺泡灌洗液／血清伊文氏蘭比值隨肺損傷的加重而升高。浸潤到肺組織的白細(xì)胞明顯增多并表達(dá)NF-кB、MCP-1蛋白和MIP-2蛋白。MCP-1與MIP-2mRNA的表達(dá)與胰腺的病理損傷成正相關(guān)，經(jīng)NAC干預(yù)后，NF-кB活性下降，趨化因子的表達(dá)下調(diào)，白細(xì)胞浸潤減少，肺組織損傷

7、得到改善(P<0．05或0．01)。 結(jié)論：SAP早期，肺組織中存在NF-кB的活化及MCP-1、MIP-2的過表達(dá)，趨化因子通過募集和激活白細(xì)胞參與AP相關(guān)性肺損傷的發(fā)病機(jī)制。NAC通過抗氧化與抑制NF-кB減少了趨化因子MCP-1與MIP-2的轉(zhuǎn)錄與分泌，使AP相關(guān)性肺損傷得到改善。 第三部分腸內(nèi)與腸外營養(yǎng)對重癥急性胰腺炎腸屏障功能影響的多中心臨床研究。 目的：研究早期腸內(nèi)營養(yǎng)與腸外營養(yǎng)對SAP患者腸道屏障功

8、能、全身炎癥反應(yīng)和免疫功能的影響，客觀評價早期腸內(nèi)營養(yǎng)在臨床SAP治療中的價值。 方法：將4個醫(yī)療單位符合SAP入選標(biāo)準(zhǔn)的患者隨機(jī)分為EN組或TPN組。TPN組從靜脈補(bǔ)充營養(yǎng)液；EN組經(jīng)鼻空腸管給予高能腸內(nèi)營養(yǎng)液聯(lián)合谷氨酰胺、精氨酸，同時給予微生態(tài)制劑和腸道去污。二組患者的檢測指標(biāo)包括(1)預(yù)后指標(biāo)：住院時間、治療費(fèi)用及并發(fā)癥等。(2)腸道通透性：血漿內(nèi)毒素、二胺氧化酶(DAO)水平，尿乳果糖／甘露醇(L／M)比值與脂肪酸結(jié)合蛋

9、白(IFABP)。(3)急性相反應(yīng)：血TNF-α、IL-1B和C-反應(yīng)蛋白(CRP)。(4)全身免疫反應(yīng)：血IgG、IgM、IgA水平和T細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+百分比及CD4+/CD8+比值。結(jié)果63例SAP患者入組，29例接受EN,34例接受TPN，二組患者多能耐受EN或TPN。EN組與TPN組比較，治療費(fèi)用(2．59±1．42Vs4．68±4．03,P<0．05)明顯減少，住院時間有縮短趨勢(20．0±5．7Vs34．

10、5±12．94,P<0．05)，感染發(fā)生率明顯降低(3．44％Vs26．47％，P<0．05)。入組治療前，二組血漿內(nèi)毒素、二胺氧化酶、血TNF．Q、IL．1β和C-反應(yīng)蛋白水平均明顯上升，血免疫球蛋白IgG、IgM、CD4+T細(xì)胞和CD4+／CD8+比值均明顯下降，尿乳果糖／甘露醇比值與脂肪酸結(jié)合蛋白濃度顯著升高。EN組與TPN組治療后比較：血漿內(nèi)毒素、DAO、CRP和尿L／M比值、尿IFABP水平迅速下降，CD4+T細(xì)胞數(shù)量和CD4