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1、目的:探討高遷移率族蛋白A2(HMGA2)過表達(dá)對(duì)大鼠垂體瘤細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及遷移侵襲行為的影響。
方法:制備攜帶HMGA2基因的質(zhì)粒(pIRES2-dsRed-HMGA2cDNA),然后將該質(zhì)粒通過LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染大鼠GH3細(xì)胞。通過Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染pIRES2-dsRed-HMGA2cDNA的大鼠GH3細(xì)胞中HMGA2蛋白表達(dá)情況,CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HMGA2基因過表達(dá)對(duì)
2、大鼠GH3細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞儀檢測(cè)HMGA2基因過表達(dá)對(duì)大鼠GH3細(xì)胞周期的影響。Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HMGA2過表達(dá)對(duì)GH3細(xì)胞遷移能力的影響。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HMGA2過表達(dá)對(duì)GH3細(xì)胞侵襲能力的影響。
結(jié)果: pIRES2-dsRed-HMGA2cDNA轉(zhuǎn)染大鼠GH3細(xì)胞24h后,HMGA2蛋白表達(dá)水平高于對(duì)照組(P<0.05), pIRES2-dsRed-HMGA2cDNA組與對(duì)照組相比細(xì)
3、胞增殖數(shù)量增加,同時(shí)G1期所占比例減少,S期所占比例增加(P均<0.05)。Transwell遷移實(shí)驗(yàn)顯示:HMGA2組細(xì)胞遷移能力較對(duì)照組明顯升高(P<0.05)。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示:與對(duì)照組相比,HMGA2組穿過Matrigel基質(zhì)膠及濾膜的細(xì)胞數(shù)明顯增加(P<0.05)。
結(jié)論:通過轉(zhuǎn)染人工合成質(zhì)粒使HMGA2基因過表達(dá)能夠促進(jìn)大鼠垂體瘤細(xì)胞增殖,并改變GH3細(xì)胞正常周期,同時(shí)還可以增強(qiáng)GH3細(xì)胞遷移及侵襲能
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