進(jìn)境臺灣十字花科蔬菜有害生物風(fēng)險(xiǎn)分析及番茄斑萎病毒快速檢測方法研究.pdf

1、隨著兩岸直接往來的日益頻繁和農(nóng)業(yè)合作的不斷深化，臺灣農(nóng)產(chǎn)品輸往大陸，即面臨不斷簡化查驗(yàn)手續(xù)的需求，又面臨攜帶有害生物風(fēng)險(xiǎn)較高的情況，這些都對檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)的把關(guān)、快檢快放和檢疫處理能力提出了更高要求。但由于歷史原因，對臺灣主要農(nóng)產(chǎn)品有害生物發(fā)生情況沒有進(jìn)行過系統(tǒng)收集、調(diào)查和研究，無法展開風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警及有害生物風(fēng)險(xiǎn)分析工作，使得日常檢疫工作具有盲目性；此外，由于口岸快速檢驗(yàn)檢疫技術(shù)和檢疫處理技術(shù)的缺乏，使得快速通關(guān)和促進(jìn)對臺貿(mào)易的良好愿望無法有

2、效實(shí)現(xiàn)。因此，提高對臺檢疫的預(yù)警、快速檢驗(yàn)檢疫和檢疫處理能力勢在必行。本文主要對進(jìn)境臺灣十字花科蔬菜進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析并研究了臺灣有分布的重要檢疫性有害生物番茄斑萎病毒的快速檢測方法。 本文對進(jìn)境的臺灣十字花科蔬菜有害生物的種類進(jìn)行收集整理，確定臺灣十字花科蔬菜主要有害生物名單，共69種，其中昆蟲54種，真菌8種，細(xì)菌2種，病毒4種，線蟲1種；然后從有害生物在大陸地區(qū)分布情況、是否采取官方控制措施、進(jìn)境植物及植物產(chǎn)品攜帶的可能性及該有

3、害生物的潛在的經(jīng)濟(jì)影響等方面，篩選出了進(jìn)境臺灣十字花科蔬菜大陸關(guān)注的潛在檢疫性有害生物種類；采用定性分析的方法，對這些潛在檢疫性有害生物進(jìn)行了進(jìn)一步的風(fēng)險(xiǎn)評估，評價(jià)了其風(fēng)險(xiǎn)等級；最終確定了6種進(jìn)境臺灣十字花科蔬菜大陸應(yīng)關(guān)注的檢疫性有害生物(1種高風(fēng)險(xiǎn)、3種中風(fēng)險(xiǎn)及2種低風(fēng)險(xiǎn))及2種非檢疫限定性有害生物名單。對本風(fēng)險(xiǎn)評估的不確定性也進(jìn)行了簡要闡明。最后提出了有針對性的一些降低風(fēng)險(xiǎn)的管理措施。 番茄斑萎病毒(TSWV)在臺灣有分布，

4、本文應(yīng)用免疫捕獲RT-PCR(IC\RT-PCR)方法來檢測TSWV，根據(jù)TSWV核衣殼(N)基因設(shè)計(jì)了引物，篩選出了一對TSWV特異性引物并優(yōu)化了反應(yīng)條件。應(yīng)用免疫捕獲技術(shù)來獲取的高質(zhì)量核酸進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成cDNA模板。使用篩選出的引物特異性擴(kuò)增eDNA模板，可以擴(kuò)增出一條230bp左右的條帶，與預(yù)期結(jié)果一致。產(chǎn)物測序結(jié)果經(jīng)過Blast發(fā)現(xiàn)與已發(fā)布的TSWV N基因序列(Ncbi數(shù)據(jù)庫編號X61799.1)同源性最高可達(dá)99％以上，