?；撬徜\對冷應(yīng)激大鼠腦體功能保護作用及其相關(guān)機制研究.pdf

1、目的： 動物急性(短期)暴露于寒冷環(huán)境中，即開始產(chǎn)生冷應(yīng)激反應(yīng)，可引起學習記憶、行為、情緒等高級功能障礙。在機體所有器官中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)對應(yīng)激反應(yīng)最為敏感。牛磺酸(Tau)對腦發(fā)育和腦功能的維持起重要作用，而鋅(Zn)是公認的腦功能保護劑，并已明確鋅有抗疲勞作用。本研究通過觀測?；撬徜\(TZC)對冷應(yīng)激大鼠腦體功能、皮層和海馬結(jié)構(gòu)NOS活力、nNOS蛋白和基因表達及HIF-1a mRNA表達的影響，研究TZC對冷應(yīng)激大

2、鼠腦體功能保護作用及其相關(guān)機制。 方法： 取健康雄性體重(105±15)g Wistar大鼠80只(天津?qū)嶒瀯游镏行?，隨機分為4組(n=20)：正常對照組、正常水溫組、單純冷浴組、TZC冷浴組(飲0.34g/L TZC水，普通飼料)，喂養(yǎng)30d。復制大鼠冷應(yīng)激模型，在冷應(yīng)激結(jié)束后2h，采用“Y”迷宮和斜板實驗測試大鼠學習記憶能力及運動耐力，NADPH-d組織化學、ABC免疫組織化學和RT-PCR方法測定大鼠腦組織NOS

3、的活性、nNOS蛋白和基因表達水平以及HIF-1a基因表達水平。 結(jié)果： 1．腦體功能測試結(jié)果 (1)體重增量：冷浴前各組大鼠體重增量比較無顯著性差異(P>0.05)。在冷浴后2h和4h，TZC冷浴組和單純冷浴組體重增量較正常對照組和正常水溫組均明顯降低(P<0.05)，在冷浴后6h，只有單純冷浴組較正常對照組和正常水溫組明顯降低(P<0.05)。在冷浴后8h，各組間比較均無顯著性差異(P>0.05) (

4、2)Y-迷宮實驗：單純冷浴大鼠迷宮實驗正確率較正常對照大鼠明顯下降，差異有顯著性(P<0.05)，同時其正確率較正常水溫組和TZC冷浴組也明顯下降(P<0.05)；而正常對照組、正常水溫組、TZC冷浴組之間兩兩比較，均無顯著性差異(P>0.05)。 (3)斜板實驗：在冷浴后2h、4h，單純冷浴大鼠與正常對照組比較，斜板實驗角度明顯降低(P<0.05)，同時較正常水溫組和TZC冷浴組也明顯下降(P<0.05)；TZC冷浴組與正常對

5、照組比較，只在冷浴后2h斜板實驗角度明顯降低(P<0.05)； 在冷浴后其它時間點各組間均無顯著性差異(P>0.05)。 2、NADPH-d組織化學和nNos免疫組織化學實驗結(jié)果 冷應(yīng)激后，各實驗組大鼠皮層和海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)NADPH-d、nNOS神經(jīng)元細胞形態(tài)和分布模式與正常對照組無明顯區(qū)別。單純冷浴組大鼠與正常對照組相比，皮層和海馬CA<,1>區(qū)NADPH-d、nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)量明顯增多，差異有顯著性(P<0.

6、05)，同時較正常水溫組和TZC冷浴組也明顯增多(P<0.05)：而正常對照組、正常水溫組、TZC冷浴組之間比較，均無顯著性差異(P>0.05)。在海馬CA<,3>區(qū)和DG，各組大鼠NADPH-d、nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)量未見明顯變化。 3、RT-PCR結(jié)果 (1)牛磺酸鋅對冷應(yīng)激大鼠nNOS mRNA表達的影響：單純冷浴組大鼠皮層nNOS產(chǎn)物電泳條帶相對較強，產(chǎn)量較高，其光密度值較正常對照組明顯升高(P<0.05)，同時

7、較正常水溫組和TZC冷浴組也明顯升高，差異有顯著性(P<0.05)；而正常對照組、正常水溫組、TZC冷浴組之間比較，均無顯著性差異(P>0.05)。 (2)?；撬徜\對冷應(yīng)激大鼠HIF-1a mRNA表達的影響：正常對照組和正常水溫組無HIF-1a mRNA表達，而冷浴后TzC冷浴組和單純冷浴組大鼠腦組織HW-1a mRNA相對含量較正常對照組和正常水溫組均明顯升高(P<0.05)；其中TZC冷浴組電泳條帶最亮，吸光度值最高，HI