椿葉花椒組織培養(yǎng)與植株再生技術(shù)研究.pdf

1、本試驗以椿葉花椒實生苗幼苗的根、莖、葉及一年生帶腋芽的莖段為外柿體材料進(jìn)行組織培養(yǎng)植株再生技術(shù)研究,通過正交實驗設(shè)計及統(tǒng)計分析方法,確定植株再生的可能途徑及適宜的培養(yǎng)條件,篩選出各階段的適宜培養(yǎng)基,以期建立椿葉花椒組織培養(yǎng)的技術(shù)體系,并通過顯微結(jié)構(gòu)觀察來探索組培苗不定根的起源機理。結(jié)果表明:
　　 1.以實生苗幼苗(根、莖、葉)為外植體誘導(dǎo)愈傷組織,由于其組織太嫩加上消毒過程中升汞的藥害作用,導(dǎo)致外植體沒有愈傷組織的發(fā)生最后以死

2、亡告終,試驗宣告失敗；以一年生帶腋芽的莖段誘導(dǎo)愈傷組織則獲得成功。
　　 2.初代培養(yǎng)以帶腋芽的莖段為外植體,能誘導(dǎo)大量不定芽萌發(fā)。消毒劑選用70％酒精+0.1％升汞,消毒時間為酒精30秒,升汞6分鐘,無菌外植體獲得率為50％。適宜的培養(yǎng)基為:WPM+6-BA2.5 mg/L+NAA2.0mg/L+IBA0.5mg/L；愈傷組織誘導(dǎo)的適宜培養(yǎng)基為:WPM+6-BA2.5mg/L+NAA1.0mg/L。
　　 3.增殖培養(yǎng)

3、階段:通過L9(33)正交及單因子實驗,得出適于誘導(dǎo)椿葉花椒芽的增殖培養(yǎng)基為:WPM+6-BA0.2 mg/L+IBA0.1mg/L+NAA0.1mg/L,增殖系數(shù)為5.6,增殖芽甲均高達(dá)5.5cm；愈傷組織增殖培養(yǎng)的最適培養(yǎng)基為WPM+6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。BA為椿葉花椒增殖培養(yǎng)的主要影響因素。
　　 4.生根培養(yǎng)階段:通過L9(33)正交及單因子實驗,得出適于生根培養(yǎng)基為:1/4