白細胞介素-1F7基因Thr42Ala錯義突變的功能學研究.pdf

1、白細胞介素（Interleukin）是一類具有調節(jié)和激活免疫細胞、介導淋巴細胞的增殖活化作用，并參與炎癥反應的細胞因子。白細胞介素1家族（Interleukin-1 family， IL-1F）成員大多是促炎細胞因子，人類白細胞介素-1F7（IL-1F7）作為其中為數較少的抑炎細胞因子之一，是IL-1家族中唯一的與鼠非同源基因。
　　IL-1F7基因位于2號染色體，有五種不同的剪切變體（IL-1F7a、IL-1F7b、IL-1F7

2、c、IL-1F7d、IL-1F7e），IL-IF7b是最長的轉錄本，是參與炎癥相關性疾病的發(fā)生的重要基因。正常情況下IL-1F7b主要在細胞質中表達，脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激可引起IL-1F7進入細胞核表達。
　　位于IL-1F7第二個外顯子的單核苷酸多態(tài)性（SNP）位點rs3811047為A→G堿基變異，可導致IL-1F7第42位氨基酸編碼由蘇氨酸（Threonine，Thr）變?yōu)楸彼幔ˋla

3、nine，Ala）。本研究主要對該基因變異的功能進行細胞學分析，并研究Thr42Ala錯義突變對IL-1F7基因功能的影響。
　　構建了IL-1F7-EGFP-C1及IL-1F7-Thr42Ala-EGFP-C1質粒，針對IL-1F7及其錯義突變Thr42Ala對細胞凋亡的影響和細胞核定位兩方面作了研究，結果顯示：（1）IL-1F7野生型及突變型都能抑制細胞的凋亡，二者對細胞凋亡的抑制作用無明顯差異。由于LPS能引起細胞凋亡，且炎

4、癥與細胞凋亡關系密切，在研究中首次發(fā)現了IL-1F7可顯著抑制由LPS引起的細胞凋亡，這為研究IL-1F7的功能提供了新線索；（2）正常情況下，IL-1F7野生型及Thr42Ala錯義突變主要在細胞質中表達，LPS能引起二者進入細胞核，且二者在細胞的定位無顯著性差異，蛋白質結構預測也顯示該突變蛋白與野生型無顯著性差異，提示該突變可能是通過影響IL-1F7細胞中定位以外的其他機制參與了炎癥相關性疾病的調控。
　　綜上所述，本次研究對