蔓荊子總黃酮及紫花牡荊素對肺癌A549細胞生長和凋亡的影響.pdf

1、目的：檢定蔓荊子總黃酮(FVTF,Fructus Viticis total flavonoids)及其活性成分紫花牡荊素(CAS, casticin)對人肺癌A549細胞生長抑制作用和誘導細胞凋亡作用；探討FVTF及CAS誘導A549細胞生長抑制和凋亡的機制是否涉及下調(diào)叉頭盒轉錄因子M1(FoxM1)蛋白表達。
　　方法：分別用不同濃度CAS及FVTF處理體外培養(yǎng)的A549細胞，平皿集落形成法測定CAS及FVTF對A549細胞生

2、長的抑制率；AO/EB熒光染色觀察細胞凋亡形態(tài)；碘化丙啶(PI, propidium lodide)染色流式細胞術( FCM,flow cytometry)檢測細胞凋亡率及細胞周期；Western Blot檢測FoxM1蛋白表達水平。
　　結果：①平皿集落形成法測定0.3、1、3、10、15、30μmol/L的CAS組與3μg/ml的DDP組，A549細胞的集落抑制率分別為2.06±0.38％、19.51±2.61%、46.15±

3、5.12%、58.16±7.76%、65.67±3.11%、71.86±2.90%和73.55±2.89%，呈濃度依賴性，IC50為7.26μmol/L，與溶媒對照組對比(P<0.05)；②AO/EB染色熒光顯微鏡下觀察10、30μmol/L的CAS組與3μg/ml的DDP組，可見A549細胞呈典型凋亡細胞形態(tài)學改變；③PI染色流式細胞術測得溶媒對照組、3、10、30μmol/L的CAS組與3μg/ml的DDP組的細胞凋亡率分別為1.8

4、1±0.91%、3.26±2.08%、5.27±4.29%、10.64±5.40%及23.13±6.91%，呈濃度依賴性，10、30μmol/L的CAS組與溶媒對照組對比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；④Western Blot檢測出CAS下調(diào) A549細胞 FoxM1蛋白表達，呈濃度和時間依賴性，與溶媒對照組對比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。⑤平皿集落形成法測定1、5、10、20、30、40μg/ml的FVTF組與3μg/m

5、l的DDP組，集落抑制率分別為3.72±0.39%、27.00±3.74%、40.41±1.72%、53.63±2.38%、67.78±3.23%、71.86±2.28%和72.25±2.33%，呈濃度依賴性，IC50為16.02μg/ml，與溶媒對照組對比(P<0.05)；⑥AO/EB染色熒光顯微鏡下觀察20、40μg/ml的FVTF組與3μg/ml的DDP組，可見A549細胞呈典型凋亡細胞形態(tài)學改變；⑦PI染色流式細胞術測得溶媒對照

6、組、10、20、40μg/ml的FVTF組與3μg/ml的DDP組細胞凋亡率分別為1.81±0.91%、4.35±0.91%、6.74±0.57%、8.67±0.58%及23.13±6.91%，呈濃度依賴性，20、40μg/ml FVTF組與溶媒對照組對比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；⑧Western Blot結果表明經(jīng)FVTF處理的A549細胞FoxM1蛋白表達未見明顯變化。
　　結論：1、紫花牡荊素具有抑制人肺癌A549