遮目魚(Chanos chanos)生長、生理對鹽度脅迫的響應(yīng)及消化道內(nèi)分泌細(xì)胞的鑒別與定位.pdf

1、為了解和認(rèn)識(shí)遮目魚鹽度適應(yīng)性及消化道生理生化功能，本文使用通徑分析方法對鹽度脅迫下生長的遮目魚形態(tài)性狀進(jìn)行了比較研究，對遮目魚的淡水馴化養(yǎng)殖進(jìn)行了初步探索和研究，使用組織學(xué)方法和電鏡技術(shù)對遮目魚鰓及鰓線粒體豐富細(xì)胞進(jìn)行了研究，使用免疫組織化學(xué)方法對遮目魚消化道內(nèi)分泌細(xì)胞進(jìn)行鑒別和定位，主要結(jié)果如下：
　　1.鹽度脅迫對遮目魚幼魚存活、生長及性狀相關(guān)性的影響
　　研究了鹽度脅迫對遮目魚（Chanos chanos）幼魚存活、生

2、長的影響，分析了在不同鹽度下各形態(tài)性狀對體質(zhì)量的影響。設(shè)置鹽度梯度為0、10、20、27（自然海水）、35，共5個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組3個(gè)平行。幼魚不經(jīng)過過渡直接放入各測試鹽度中，養(yǎng)殖30d后統(tǒng)計(jì)存活率，測量每尾魚的體質(zhì)量及各表型形態(tài)性狀，以體質(zhì)量為因變量（y），各形態(tài)性狀為自變量（x）進(jìn)行通徑分析和決定系數(shù)分析。結(jié)果表明，鹽度0組的幼魚存活率最低（73.33％），增重率（573.94±231.58）%和特定生長率（6.23±1.16）%最高，

3、與其他組差異極顯著（P＜0.01）。除鹽度0組外，其他各組幼魚的存活率均在90%以上，且幼魚特定生長率和增重率在各組之間差異不顯著（P＞0.05）。相關(guān)分析表明，幼魚的各形態(tài)性狀與其體質(zhì)量之間呈極顯著的相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）。通徑分析表明，遮目魚幼魚的體長、全長和體高對體質(zhì)量的影響最大，且在不同鹽度脅迫下對幼魚體質(zhì)量的決定作用不同，其他性狀對體質(zhì)量的影響較小。建立了鹽度脅迫下形態(tài)性狀對體質(zhì)量影響的最優(yōu)回歸方程。
　　2.遮目魚幼

4、魚鰓線粒體豐富細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)及其在不同鹽度下的變化
　　本實(shí)驗(yàn)通過普通光學(xué)顯微鏡、透射電子顯微鏡和掃描電子顯微鏡的方法，研究不同鹽度條件下（鹽度0、10、20、27、35）廣鹽性海水魚類遮目魚幼魚鰓結(jié)構(gòu)和鰓上線粒體豐富細(xì)胞分布及結(jié)構(gòu)的變化。鰓線粒體豐富細(xì)胞呈橢圓形或卵圓形，內(nèi)含有大量線粒體，細(xì)胞核較大。在不同鹽度條件下遮目魚幼魚出現(xiàn)兩種鰓線粒體豐富細(xì)胞：（1）具有頂端小窩、線粒體體積較大的A型線粒體豐富細(xì)胞；（2）單獨(dú)存在、線粒體

5、體積較小的B型線粒體豐富細(xì)胞。隨著鹽度降低，A型線粒體豐富細(xì)胞及其線粒體數(shù)量減少、體積減小，電子密度降低，頂端開口變小甚至關(guān)閉。鹽度降至淡水條件下，鰓小片腫脹、脫落，鰓小片上增生出具有大面積平滑或波狀的頂端開口的B型線粒體豐富細(xì)胞。結(jié)果表明，在高滲環(huán)境下，A型線粒體豐富細(xì)胞較為豐富和發(fā)達(dá)，其結(jié)構(gòu)特征適應(yīng)了離子分泌的功能，為海水型線粒體豐富細(xì)胞，在低滲環(huán)境下，B型線粒體豐富細(xì)胞較為豐富，其結(jié)構(gòu)特征適應(yīng)了離子吸收的功能，為淡水型線粒體豐富細(xì)

6、胞。不同結(jié)構(gòu)類型鰓線粒體豐富細(xì)胞的存在使得廣鹽性海水魚類可以適應(yīng)較廣的鹽度范圍變化。
　　3.淡水馴化養(yǎng)殖條件下遮目魚幼魚的成活、生長及鰓的變化
　　研究了淡水馴化養(yǎng)殖條件下遮目魚幼魚的成活、生長及鰓組織學(xué)變化。遮目魚幼魚經(jīng)6 d的馴化至淡水，養(yǎng)殖30 d。試驗(yàn)結(jié)束后，統(tǒng)計(jì)成活率、增重率和特定生長率，取幼魚鰓觀察結(jié)構(gòu)變化，并與未經(jīng)馴化直接投入淡水的條件下以及在自然海水條件下養(yǎng)殖的幼魚進(jìn)行比較分析。試驗(yàn)結(jié)果表明，在淡水馴化條件

7、下遮目魚幼魚具有較高的成活率100%、增重率（664.96±113.07）%和特定生長率（6.77±0.52）%。鰓組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)在淡水條件下遮目魚幼魚鰓小片上增生出大量線粒體豐富細(xì)胞，可能是遮目魚幼魚在淡水條件下保持較高成活率的原因之一。
　　4.遮目魚消化道內(nèi)分泌細(xì)胞的免疫組織化學(xué)鑒別與定位
　　通過免疫組織化學(xué)方法對遮目魚消化道內(nèi)分泌細(xì)胞進(jìn)行鑒別和定位。分別取遮目魚消化道食道、胃賁門部、胃盲囊部、胃幽門部、幽門盲囊、前

8、腸、中腸、后腸以及直腸等部位。對以上部位的內(nèi)分泌細(xì)胞的分布和密度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和描述，內(nèi)分泌細(xì)胞種類分別為分泌胃泌素（Gastrin，GAS）、膽囊收縮素（Cholecystokinin，CCK）、亮氨酸腦啡肽（Leu-enkephalin，L-ENK）、神經(jīng)肽Y（Neuropeptide Y，NPY）和生長抑素（Somatostatin，SST）的細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，食道未發(fā)現(xiàn)內(nèi)分泌細(xì)胞；全胃觀察到大量SST內(nèi)分泌細(xì)胞，但未觀察到其他激素種類的

9、內(nèi)分泌細(xì)胞；幽門盲囊發(fā)現(xiàn)少量L-ENK和SST內(nèi)分泌細(xì)胞，但未發(fā)現(xiàn)其他種類的內(nèi)分泌細(xì)胞；所有種類的內(nèi)分泌細(xì)胞在遮目魚前腸上均有分布，各激素內(nèi)分泌細(xì)胞在腸道的分布密度和分布部位不同。在遮目魚腸道和幽門盲囊上發(fā)現(xiàn)兩種不同類型的內(nèi)分泌細(xì)胞，一種位于消化道黏膜的上皮細(xì)胞之間，呈梭形或梨形，為開放型內(nèi)分泌細(xì)胞，另一種細(xì)胞位于消化道黏膜的中部或基底處，呈圓形或球形，為封閉型內(nèi)分泌細(xì)胞，位于胃部的內(nèi)分泌細(xì)胞屬于開放型內(nèi)分泌細(xì)胞。結(jié)果表明，前腸部位可能