肉蓯蓉總苷對帕金森病大鼠紋狀體細胞外液中單胺類神經(jīng)遞質含量的影響.pdf

1、目的：建立基于腦微透析(BMD)和高效液相-電化學檢測法(HPLC-ECD)的實驗方法；制作6-羥基多巴胺(6-OHDA)損傷致急性帕金森病(PD)大鼠模型；研究肉蓯蓉總苷(GCs)對6-OHDA損傷致急性PD模型大鼠紋狀體細胞外液中單胺類遞質含量的影響，以探討其對腦神經(jīng)保護作用的可能機制。 方法:40只雄性Wistar大鼠分為三批，第1批5只用于BMD和HPLC-ECD實驗方法的建立，按照A：+0.2mm、L：+3mm、V：3

2、.5mm的坐標定位至大鼠右側紋狀體，次日通過微透析(灌流速度1.5μl·min<'-1>，每20min收集一管)收集透析液并將其注入高效液相-電化學檢測器(HPLC-ECD)測定各組大鼠透析液中多巴胺(DA)、3，4-二羥基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量，以確定實驗方法是否可行。第2批10大鼠在BMD和HPLC-ECD實驗方法建立的基礎上，隨機分為對照組和模型組各5只，按照前述坐標定位至大鼠右側紋狀體，然后向模型組大鼠右

3、側紋狀體內(nèi)注入6-OHDA 12μg/4μl(用含0.1％抗壞血酸的0.9％氯化鈉溶液配制)制作急性PD模型，對照組大鼠同一部位注射等量生理鹽水。于注入后第7天插入微透析探針收集透析液并將其注入HPLC-ECD測定各組大鼠透析液中DA、DOPAC和HVA的含量。經(jīng)分析確定模型成功后，將第3批25只大鼠隨機分為對照組、模型組、GCs大劑量組、GCs小劑量組和美多巴(MD)組。對照組紋狀體內(nèi)注射等量生理鹽水，其余各組均注射6-OHDA，劑量

4、同前述。術后按下述劑量分別腹腔注射給與不同藥液，連續(xù)給藥7天，每日一次：對照組：蒸餾水2ml·kg<'-1>；模型組：與對照組等量蒸餾水，所用蒸餾水與對照組為同一批次制備而成：GCs小劑量組：劑量為3.5mg/2ml·kg<'-1>；GCs大劑量組：劑量為7.0mg/2ml·kg<'-1>;MD組：劑量為13mg/2ml·kg<'-1>。于第7天進行微透析試驗，將透析液注入HPLC-ECD測定各組紋狀體細胞外液中DA、DOPAC和HVA

5、的含量，分析比較測定結果。 結果：基于BMD和HPLC-ECD的實驗方法可成功測定大鼠紋狀體細胞外液中DA、DOPAC和HVA的含量；與對照組相比，模型組動物紋狀體細胞外液中DA、DOPAC和HVA含量均顯著性降低(P<0.001)；而GCs大劑量組、GCs小劑量組和美多巴(MD)組三種物質的含量則明顯高于模型組，兩兩相比具有統(tǒng)計學意義(P<0.05，P<0.01或P<0.001)。 結論：基于BMD和HPLC-ECD的