雌鼠不同生殖周期特定腦區(qū)突觸外GABAA受體表達(dá)研究.pdf

1、女性生殖周期雌孕激素呈現(xiàn)周期性變化，尤其是妊娠過程和分娩后激素的較大變化使得女性出現(xiàn)各種各樣情緒障礙及各種臨床癥狀。有研究認(rèn)為,婦女的以上各類精神疾病均有女性生殖周期雌、孕激素等卵巢甾體激素的波動所引發(fā)。這些臨床癥狀的出現(xiàn)與孕激素對GABAA調(diào)節(jié)系統(tǒng)的作用有關(guān)。但體內(nèi)神經(jīng)甾體激素及其中樞神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)控變化與此類抑郁癥相關(guān)性的認(rèn)識尚未統(tǒng)一，現(xiàn)有的研究尚不足以揭示此類疾病發(fā)生的實(shí)質(zhì)。對激素與相關(guān)情緒變化相關(guān)關(guān)系的研究，將對揭示激素與情緒變化

2、的機(jī)理提供新的科學(xué)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)以此為出發(fā)點(diǎn),研究嚙齒類動物鼠在不同生殖周期各項(xiàng)指標(biāo)的變化,分析各組它們血清孕激素含量與不同腦區(qū)突觸外GABAA受體δ亞基的表達(dá)的相關(guān)性。
　　文章從以下兩部分就雌鼠不同生殖周期特定腦區(qū)突觸外GABAA受體表達(dá)研究進(jìn)行了綜述。
　　第一部分：雌性小鼠不同生殖周期大腦皮層和海馬突觸外 GABAA受體的表達(dá)研究
　　目的：探究雌性小鼠不同動情周期動物行為學(xué)的變化，不同生殖周期皮層及海馬突觸外G

3、ABAA受體的表達(dá)的變化。
　　方法：以6周齡有完整動情周期雌性 C57BL/6J小鼠實(shí)驗(yàn)對象,采用陰道涂片法,每天分8:00、16:00和22:00三個(gè)時(shí)間段進(jìn)行動情周期的鑒別,以精確判斷小鼠動情周期,篩選出具有完整生殖周期的小鼠，確定其每個(gè)周期的持續(xù)時(shí)間。并將其分為兩組,即動情期組與動情間期組;Elisa檢測每組小鼠血清雌孕激素含量;高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)觀察每組小鼠的行為學(xué)變化;免疫組織化學(xué)法觀察每組小鼠海馬突觸外GABAA受體δ

4、亞基的表達(dá);分析各組小鼠血清孕激素含量與突觸外GABAA受體δ亞基的表達(dá)的相關(guān)性。
　　結(jié)果：Elisa結(jié)果顯示,動情間期組雌鼠血清孕酮含量（12.47±1.89 ng/mL）高于動情期組（6.02±2.20 ng/mL）,而雌激素水平動情間期（157.00±21.30 pg/mL）低于動情期組（185.48±35.42pg/mL）;本研究室使用的小鼠高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)顯示，動情期組與動情間期組小鼠在高架十字迷宮開臂、閉臂以及中央平

5、臺的活動總的活動時(shí)間無明顯差異，但是在開臂中小鼠活動的次數(shù)和時(shí)間，動情間期組高于動情期組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）;免疫組化結(jié)果顯示,海馬腦區(qū)GABAA受體δ亞基的陽性表達(dá)動情間期組（28.93×10-3±4.92×10-3）高于動情期組（18.89×10-3±3.74×10-3）較強(qiáng),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），大腦皮層GABAA受體δ亞基陽性表達(dá)較強(qiáng),但動情間期組（39.84×10-3±2.97×10-3）與動情期

6、組（37.31×10-3±1.13×10-3）無明顯差異（P>0.05）。動情間期與動情期海馬δ亞基陽性結(jié)果 IOD值與體內(nèi)孕酮濃度的變化呈顯著性相關(guān),相關(guān)系數(shù)為 r=0.9924。結(jié)論：1.C57BL/6J小鼠平均動情周期為5.3天,小鼠血液雌激素濃度動情期組高于動情間期組，血液孕酮濃度動情間期組高于動情期組，雌、孕酮在小鼠體內(nèi)隨卵巢變化呈周期性的變化。2.在小鼠生理狀況下,不同生殖周期雌孕激素水平會發(fā)生波動,進(jìn)而影響 GABAA受體

7、δ亞基在不同生殖周期特定腦區(qū)的表達(dá)。海馬腦區(qū)突觸外GABAA受體δ亞基的表達(dá)在動情期低,而動情間期高,且突觸外δ亞基的表達(dá)隨孕酮濃度的增高而加強(qiáng),兩者呈線性相關(guān)。3.大腦皮層突觸外GABAA受體δ亞基的表達(dá)在動情間期與動情期無明顯差異。4.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示：動情間期小鼠在高架十字迷宮上進(jìn)入開臂的時(shí)間和次數(shù)大于動情期小鼠，動情間期小鼠對環(huán)境變化的適應(yīng)性增高。
　　第二部分：大鼠大腦海馬齒狀回、杏仁核突觸外GABAA受體表達(dá)與生殖周期雌

8、孕激素變化相關(guān)性研究
　　目的：明確生殖周期中卵巢甾體激素波動是否引發(fā)特定腦區(qū)神經(jīng)元突觸外GABAA受體表達(dá)變化及相關(guān)性。方法：陰道涂片法篩選出具有完整生殖周期的大鼠，并將其分為兩組，動情期組與動情間期組；Elisa檢測每組大鼠血清雌孕激素含量；免疫組化法觀察每組大鼠海馬齒狀回、杏仁核突觸外GABAA受體δ亞基的表達(dá)；分析各組大鼠血清孕激素含量與突觸外GABAA受體δ亞基的表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果：血清雌激素含量動情期組(42.51±2

9、.42)高于動情間期組(23.17±1.45)，而孕酮含量動情期組(7.41±2.86)則低于動情間期組(10.31±1.74)，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。免疫組化結(jié)果顯示，海馬齒狀回GABAA受體δ亞基的陽性表達(dá)動情間期組(105.47±4.73)高于動情期組(79.23±2.89)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),杏仁核GABAA受體δ亞基的陽性表達(dá)動情間期(93.51±3.54)組高于動情期組(58.92±1.4