外源NO與蔗糖對鹽脅迫下番茄幼苗生理特性及抗逆基因的調(diào)控.pdf

1、本實驗以番茄(Lycopersicon esculentum Mill)為材料，運用盆栽土培試驗，結(jié)合生物化學和分子生物學的方法，分別用不同濃度的蔗糖(Sucrose)、外源NO供體硝普鈉(SodiumNitropresside，SNP)及其組合(V：V=1:1)處理材料，對鹽脅迫下NO與蔗糖誘導番茄抗逆基因和幼苗生長及抗鹽性的作用機制開展了較為深入的研究。并獲得以下主要結(jié)果： 1. 用0.1、0.5和1.0 mmol/L，的S

2、NP處理番茄幼苗，均能緩解鹽脅迫對番茄幼苗造成的氧化損傷，提高超氧化物酶歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)和抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性，其中0.1 mmol/LSNP處理效果最好，尤其能顯著誘導APX和POD活性的增高；不同濃度的蔗糖對番茄體內(nèi)的保護酶也具有不同的誘導作用，和SNP誘導一樣具有劑量效應，其中3.0 mmol/L的蔗糖能顯著提高酶活性，脅迫24 h各種酶活性均達到最大值，隨著脅迫時間的延長開

3、始下降，表明蔗糖對酶活性的誘導也有一定的調(diào)控范圍。 2.鹽分脅迫下，番茄種子的萌發(fā)受到了抑制，72 h才開始萌發(fā)，而使用NO、蔗糖及其互作處理番茄種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)都顯著高于100 mmol/LNaCl單獨處理，NO、蔗糖及其互作處理番茄種子的最終發(fā)芽率分別為68.33％、66.67％，81.67％，其中組合處理緩解鹽脅迫的效果顯著，與單鹽處理之間差異顯著。 3.組合處理與SNP和蔗糖單獨處理相比，

4、對緩解鹽脅迫下番茄幼苗的氧化損傷存在正協(xié)同效應，主要表現(xiàn)在進一步增強了番茄幼苗抗氧化酶的活性：提高脯氨酸(Pro)的含量，同時膜脂過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量顯著降低。采用聚丙烯酰胺凝膠電泳對鹽脅迫24 h和48 h材料的POD同功酶研究表明，當NaCl單獨處理時，番茄幼苗葉片POD同功酶第V條帶缺失，其它譜帶酶量減少，抑制了POD同功酶的表達：SNP和蔗糖單獨處理能夠保護鹽脅迫(24、48 h)所導致的POD同功酶條帶的完整；而NO

5、、蔗糖及組合處理均能誘導番茄葉片POD同功酶活性，尤其組合處理對POD同功酶誘導效果最好，脅迫48h各處理POD同功酶表達量較24h減少。說明SNP和蔗糖組合處理能夠更有效地緩解鹽脅迫對番茄幼苗植株造成的氧化損傷。 4.利用實時熒光定量RT-PCR技術(shù)，檢測了抗逆相關(guān)基因NP24和PR-5在mRNA水平上的表達量。脅迫12hSNP、蔗糖及組合處理均誘導了幼苗中NP24基因的表達量，與單鹽處理相比分別提高了38.44％、24.48