皺紋盤(pán)鮑養(yǎng)殖水體及其消化道中細(xì)菌動(dòng)態(tài)變化特征研究.pdf

1、作者于2013年3月至2014年2月，在廣東惠來(lái)某皺紋盤(pán)鮑（Haliotis discus hannai）養(yǎng)殖場(chǎng)采集養(yǎng)殖水樣和鮑消化道樣品。采用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)法、培養(yǎng)法和高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)樣品中細(xì)菌總數(shù)、弧菌數(shù)量、細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)組成的動(dòng)態(tài)變化特征進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。并監(jiān)測(cè)了養(yǎng)殖水體中主要的環(huán)境因子，包括水溫、溶氧、pH值、鹽度、氧化還原電位、亞硝酸鹽、硝酸鹽、氨鹽、無(wú)機(jī)磷酸鹽。分析了細(xì)菌總數(shù)、弧菌數(shù)、細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)在時(shí)間上的動(dòng)態(tài)變化特征及其與各環(huán)境因

2、子的關(guān)系，為預(yù)測(cè)養(yǎng)殖環(huán)境微生物結(jié)構(gòu)的變化、水產(chǎn)動(dòng)物健康養(yǎng)殖、疾病預(yù)防提供參考依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　1.養(yǎng)殖水中環(huán)境因子的檢測(cè)結(jié)果
　　在監(jiān)測(cè)期間水溫變化范圍為16.8～29.0℃，平均22.97℃。溶解氧變化范圍5.28～8.40 mg/L，平均6.83 mg/L。pH變化范圍為7.98～8.52，平均為8.31。鹽度變化范圍30.68～33.34，平均31.98。氧化還原電位變化范圍7.50～100.09 mv，平

3、均58.99 mv。亞硝酸鹽、硝酸鹽、氨鹽、磷酸鹽的變化范圍分別為21.45～66.50μg/L、42.60～157.40μg/L、23.75～135.83μg/L、9.82～25.25μg/L；平均值分別為29.79μg/L、88.96μg/L、62.52μg/L、19.07μg/L。
　　2.養(yǎng)殖水弧菌數(shù)量和總細(xì)菌數(shù)的檢測(cè)結(jié)果
　　養(yǎng)殖水中弧菌數(shù)量對(duì)數(shù)值全年變化1.2-3.8cfu/mL，平均2.9 cfu/mL。10月

4、和2月份弧菌數(shù)量顯著高于其它月份（P＜0.05）。4月份弧菌數(shù)量顯著低于其它月份（P＜0.05）。剩余月份的弧菌數(shù)量無(wú)顯著差異（P＞0.05）。當(dāng)T>25℃時(shí)弧菌數(shù)量與水溫極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01），與氧化還原電位極顯著正相關(guān)（P＜0.01），和硝酸鹽顯著正相關(guān)（P＜0.05）。當(dāng)T≤25℃時(shí)環(huán)境因子對(duì)弧菌數(shù)量的影響較小。養(yǎng)殖水中細(xì)菌總數(shù)全年變化5.46～5.90，平均5.7。8月份達(dá)到全年最大值，與前后兩個(gè)月份的差異顯著（P＜0.0

5、5）。次年的1月份達(dá)到全年最低谷，與12月份差異不顯著（P＞0.05），但與2月份差異顯著（P＜0.05）。
　　3.鮑消化道中弧菌數(shù)量的檢測(cè)結(jié)果
　　鮑消化道中弧菌數(shù)量對(duì)數(shù)值的變化范圍4.02～6.41，平均為5.55。5月份達(dá)到最低豐度值，6月份達(dá)到最大豐度值。6月份和次年的1、2月份無(wú)顯著差異，但明顯與其它月份的差異顯著（P＜0.05）。當(dāng)T>25℃時(shí)消化道弧菌數(shù)量與溶氧、鹽度、氨鹽顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與氧化還

6、原電位顯著正相關(guān)（P＜0.05）。當(dāng)T≤25℃時(shí)消化道弧菌數(shù)量與水中弧菌數(shù)量極顯著正相關(guān)（P＜0.01），消化道弧菌數(shù)量與溫度、亞硝酸鹽、磷酸鹽顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與溶氧、氧化還原電位極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與pH、硝酸鹽、氨鹽極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）。
　　4.養(yǎng)殖水中細(xì)菌多樣性分析結(jié)果
　　本研究結(jié)果顯示，5、6、7、8月份細(xì)菌多樣性均高于3、4、9、10、11月份細(xì)菌多樣性，其中5月份養(yǎng)殖水中細(xì)菌多樣

7、性最高，4月份細(xì)菌多樣性最低。養(yǎng)殖水中主要的細(xì)菌類(lèi)群有：變形桿菌門(mén)(Proteobacteria)，擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)，厚壁菌門(mén)(Firmicutes)，放線(xiàn)菌門(mén)（Actinobacteria），浮霉?fàn)罹T(mén)（Planctomycetes），其中擬桿菌門(mén)是7月份樣品中比例最大的菌群，變形桿菌門(mén)是其余各月份樣品中比例最大的菌群。養(yǎng)殖水中細(xì)菌多樣性與環(huán)境因子的典范對(duì)應(yīng)分析表明，5月份樣品的細(xì)菌多樣性主要影響因子為溫度（正相