多粘類(lèi)芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)Cp-S316抗真菌活性物質(zhì)的發(fā)酵、分離純化與性質(zhì)研究.pdf

1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文多粘類(lèi)芽孢桿菌（Paenibacilluspolymyxa）CpS316抗真菌活性物質(zhì)的發(fā)酵、分離純化與性質(zhì)研究姓名：王智文申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)指導(dǎo)教師：劉訓(xùn)理20070610山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文吸性能較好的樹(shù)脂，進(jìn)一步篩選了其最佳解吸劑。結(jié)果表明，大孔吸附樹(shù)脂X5對(duì)活性物質(zhì)的吸附及解吸性能最好，其吸附量為48l5x104pg／g，最佳解吸劑為001moVLHCI70％乙醇，以解吸劑：樹(shù)脂

2、：2：l(v／m)靜態(tài)解吸，解吸率達(dá)9428％?；钚晕镔|(zhì)解吸液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、冷凍干燥以后，進(jìn)一步經(jīng)過(guò)丙酮處理，DEAESepharoseFF離子交換柱層析，CMSepharoseFF離子交換柱層析，04)5mol／LNaCl梯度洗脫得到一個(gè)活性物質(zhì)洗脫峰，收集活性物質(zhì)溶液，冷凍干燥濃縮后，進(jìn)行SephadcxG50分子篩層析，得到活性物質(zhì)的中間純化物。利用RPHPLC進(jìn)行活性物質(zhì)的精制，活性物質(zhì)的最佳制備色譜條件為：乙腈：01％氟乙酸水溶

3、液=23：77(v／v)：色譜柱SinoChromODSBPC18柱(300x100mm，lOpm)，流速20mL／min，柱溫30℃，進(jìn)樣量200pL。在此色譜條件下，分離得到保留時(shí)間(Rt)為2019min的一個(gè)抗真菌活性物質(zhì)組分。3抗真菌活性物質(zhì)的理化性質(zhì)與生物學(xué)性質(zhì)。活性物質(zhì)對(duì)熱穩(wěn)定，100℃加熱100min或者121℃熱處理20min活性不變；活性物質(zhì)在pH47時(shí)，保持較高活性，對(duì)堿敏感：對(duì)紫外線穩(wěn)定，對(duì)胰蛋白酶和蛋白酶K具有