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1、 本研究從DNA、mRNA及蛋白水平對uPA表達與聲門上型喉癌侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系進行了初步探討,同時探討了ERK信號傳導(dǎo)通路的異常激活與uPA表達上調(diào)的關(guān)系,可能為深入研究喉癌侵襲和轉(zhuǎn)移的機制提供新的信息。 方法:首先收集喉癌手術(shù)切除標(biāo)本40例,10例全喉切除術(shù)的癌旁正常喉組織作為對照。然后逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測聲門上型喉癌及癌旁正常喉組織中uPA、uPAR和PAI-1 mRNA表達。Western blo
2、t法檢測聲門上型喉癌中ERK1和ERK2蛋白表達,同時檢測了ERK1/2酶活性以測定其磷酸轉(zhuǎn)移酶效率。另外鏈酶卵白素—生物素復(fù)合體(SABC)法檢測檢測聲門上型喉癌中uPA蛋白表達。甲基化特異性PCR( PCR,MSP)法檢測聲門上型喉癌中uPA基因啟動子的甲基化狀態(tài)。 研究表明:1.uPA、uPAR和PAI-1基因轉(zhuǎn)錄異??赡芘c聲門上型喉癌及喉癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。且表達上調(diào)并存在明顯的正相關(guān)性,可能在侵襲和轉(zhuǎn)移的過程
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