c-myc反義寡核苷酸對膽管癌細胞株QBC-939生長及化療敏感性的影響.pdf

1、目的：通過c-myc反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染QBC-939細胞株，探討c-myc反義寡核苷酸對QBC-939細胞株細胞周期、凋亡、及化療敏感性的影響，為研究膽管癌的治療提供新的思路。 方法： 1.常規(guī)培養(yǎng)膽管癌細胞株QBC-939。 2.合成特異性靶向c-myc反義寡核苷酸(ASODN)。 3.將QBC.939接種于六孔培養(yǎng)板內(nèi)，分為8組： ①空白對照組，不加任何干預措施；②脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染對照組，僅以空白脂質(zhì)

2、體轉(zhuǎn)染；③5umol/L SODN轉(zhuǎn)染組，轉(zhuǎn)染c-myc正義寡核苷酸，濃度為5umol/L；④10umol/L SODN轉(zhuǎn)染組，濃度為10umol/L，⑤15umol/L SODN轉(zhuǎn)染組，濃度為15μmol/L；⑥5umol/L ASODN轉(zhuǎn)染組，轉(zhuǎn)染c-myc反義寡核苷酸，濃度為5umol/L；⑦10umol/L ASODN轉(zhuǎn)染組，濃度為10umol/L；⑧15umol/L ASODN轉(zhuǎn)染組，濃度為15umol/L。作用72小時后收集

3、各組細胞，并進行后續(xù)實驗。 4.免疫組化法檢測各組細胞c-myc蛋白表達變化；流式細胞儀檢測各組細胞的周期分布和凋亡率；MTT法檢測5-Fu(lug/ul)對各組細胞的生長抑制率。 結果： 1.各濃度反義寡核苷酸組細胞c-myc蛋白表達減弱，各濃度正義寡核苷酸組和脂質(zhì)體對照組與空白對照組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 2.各濃度反義寡核苷酸組G1期細胞增多、S期細胞減少，各濃度正義寡核苷酸組和脂質(zhì)體

4、對照組與空白對照組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 3.各濃度反義寡核苷酸組細胞凋亡率增高，各濃度正義寡核苷酸組和脂質(zhì)體對照組與空白對照組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 4.等濃度化療藥物5-Fu對各濃度反義寡核苷酸組細胞的抑制率增高，各濃度正義寡核苷酸組和脂質(zhì)體對照組與空白對照組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 結論： c-myc反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染可下調(diào)c-myc蛋白的表達，阻止細胞由G1期