調(diào)腎方對慢性腎功能衰竭大鼠腎組織TGF-β1及TNF-α表達影響的實驗研究.pdf

1、目的：通過觀察調(diào)。腎方對慢性腎功能衰竭大鼠的影響，探討調(diào)腎方治療慢性腎功能衰竭的作用機理，進而闡明從氣機論治慢性腎功能衰竭的機理，挖掘治療慢性腎功能衰竭的中醫(yī)新理論，為臨床應用提供科學依據(jù)。 方法：實驗采用腺嘌呤灌胃制備大鼠慢性腎功能衰竭模型。Wistar雄性大鼠66只，體重1.70g±10g，隨機分為調(diào)腎方治療組、調(diào)腎方預防組、正常對照組、模型對照組、尿毒清對照組和包醛氧淀粉對照組，每組11只。將腺嘌呤加入0.2％羧甲基纖維素

2、鈉溶液中配制成1.7％混懸液，除正常組外，其余各組按250mg/kg·d灌胃給藥，連續(xù)給藥21天，制作大鼠腺嘌呤慢性腎功能衰竭模型。調(diào)腎方預防組于開始造模的第2天給藥，予調(diào)腎方濃縮液(1.2g/ml)灌胃。造模結(jié)束后，正常組和模型組均給予自來水1ml/100g灌胃；尿毒清組，包醛氧淀粉組，調(diào)腎方預防組，調(diào)腎方治療組給藥劑量均按人與大鼠體表面積等效劑量折算，給藥劑量分別為5g/kg·d，6/kg·d，12/kg·d，12/kg·d，每日1

3、次。治療結(jié)束后，觀察大鼠一般狀態(tài)，體重，腎功能，血脂，轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β1)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)表達變化及腎組織病理學改變。 結(jié)果： 1.一般情況以調(diào)腎方預防組最好，調(diào)腎方治療組，包醛氧淀粉組次之，尿毒清組最差。各組大鼠在造模前后及治療后體重做兩兩比較無明顯差異。 2.與模型組相比，各治療組腎功能CR、BUN及血脂F(xiàn)G、TC均明顯降低(P<0.05)，調(diào)腎方預防組與調(diào)腎方治療組對降低慢性腎功能衰

4、竭大鼠腎功能作用優(yōu)于其它治療組(P<0.05)。調(diào)腎方預防組降低上述指標的作用較調(diào)腎方治療組無顯著性差異(P>0.05)。 3.β采用免疫組化法檢測TGF-β1表達，在慢性腎功能衰竭過程中，TGF-β1的表達明顯增加(P<0.05)，調(diào)腎方治療組、調(diào)腎方預防組、尿毒清組和包醛氧淀粉組均可明顯降低TGF-β1表達(P<0.05)，調(diào)腎方各組優(yōu)于尿毒清組和包醛氧淀粉組(P<0.05)，調(diào)腎方治療組同調(diào)腎方預防組比較，TGF-β1表達

5、有顯著性差異(P<0.05)，提示調(diào)腎方預防組降低TGF-β1表達效果優(yōu)于調(diào)腎方治療組。 4.采用免疫組化法檢測TNF-α表達，在慢性腎功能衰竭過程中，TNF-α的表達明顯增加(P<0.05)，調(diào)腎方治療組、調(diào)腎方預防組、尿毒清組和包醛氧淀粉組均可明顯降低TNF-α表達(P<0.05)，調(diào)腎方各組優(yōu)于尿毒清組和包醛氧淀粉組(P<0.05)，調(diào)腎方預防組與調(diào)腎方治療組無顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論：調(diào)腎方可明顯降低C

6、R、BUN及TG、TC水平，具有明顯的腎臟保護作用，作用優(yōu)于包醛氧淀粉和尿毒清顆粒；調(diào)腎方各組可明顯抑制TGF-β1和TNF-α的表達，表明調(diào)腎方可通過減少系膜細胞增殖和細胞外基質(zhì)沉積，促進細胞外基質(zhì)降解，減輕腎小管間質(zhì)纖維化和腎小球硬化而發(fā)揮治療作用；病理學改變提示：調(diào)腎方可通過減少2，8-二羥基腺嘌呤結(jié)晶體沉積于腎小管，進而抑制腺嘌呤對腎小管、腎小球的損害作用，并且可使受損細胞得到明顯的恢復，作用優(yōu)于包醛氧淀粉和尿毒清顆粒。