山東和安徽地區(qū)三種蔬菜病毒檢測與鑒定.pdf

1、番茄及辣椒都是重要的經濟作物，近年來病毒病的爆發(fā)導致了番茄和辣椒產量減少和品質的降低，造成了嚴重的經濟損失。隨著各種檢測手段的發(fā)展，我們可以更迅速、更便捷的鑒定病毒病的種類，并采取相關措施挽回經濟損失。
　　本研究以番茄黃花曲葉病毒(Tomatoyellow leaf curl virus，TYLCV)、番茄褪綠病毒(Tomato chlorosis virus，ToCV)及辣椒輕斑駁病毒(Pepper mild mottle v

2、irus，PMMoV)為對象，用分子檢測方法完成山東、安徽兩省病原的鑒定。我們選取山東、安徽兩個省7個地區(qū)，針對3種病毒病進行田間調查，采集疑似樣品擴增序列，對其進行同源性比對和遺傳進化樹等分析，進一步了解山東、安徽兩省蔬菜產區(qū)3種病毒病的發(fā)生情況。主要研究結果如下:
　　1、通過對山東省、安徽省TYLCV發(fā)生情況的調查及檢測可知，目前TYLCV在山東省大部及安徽省局部已經發(fā)生擴散。構建的TYLCV系統(tǒng)進化樹可以分為IL、IR、M

3、ild、Gez4組，其中本研究的4個分離物和中國所有的分離物一起聚類在IL組。對感病TYLCV樣品進行衛(wèi)星DNA的檢測，沒有獲得明顯目的條帶。
　　2、通過RT-PCR檢測及序列分析，首次確定ToCV在安徽地區(qū)發(fā)生，且統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)兩省六個地區(qū)ToCV、TYLCV存在單獨侵染及復合侵染。分別基于ToCV CP和ToCV HSP70構建系統(tǒng)進化樹，結果發(fā)現(xiàn)ToCV分離物都可分為兩個大組，其中本研究所得到的分離物均與中國其他地區(qū)的分離物聚類

4、到Ⅰ組。通過計算分離物ToCV的CP與HSP70兩個基因的同義突變(dS)和非同義突變(dN)的比率(dN/dS)，結果顯示，CP與HSP70基因均處于負向（或凈化）選擇的壓力之下且所承受的壓力不同。
　　3、通過對山東濟寧辣椒的田間調查發(fā)現(xiàn)，PMMoV在辣椒葉片上呈現(xiàn)輕微的褪綠或者斑駁癥狀。對山東濟寧辣椒病株進行RT-PCR擴增，經鑒定，確定其病原為PMMoV，表明感病的濟寧辣椒樣品確系被PMMoV感染。并與日本分離物(AB06