致雞胚死亡原因的流行病學(xué)調(diào)查.pdf

1、雞的胚胎性疾病是指雞胚在發(fā)育過程中,由于某些異常的理化和生物因素的作用,出現(xiàn)發(fā)育偏差,以致發(fā)生病變、畸形和死亡的現(xiàn)象。雞胚胎病根據(jù)其發(fā)病機(jī)理和發(fā)病原因的不同可將其分為遺傳性胚胎病、營養(yǎng)性胚胎病、傳染性胚胎病以及孵化條件不當(dāng)引起的胚胎病,其中以傳染性胚胎病最為常見,給種雞場帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此本實(shí)驗(yàn)對造成雞胚胎病的發(fā)病原因及流行病學(xué)進(jìn)行系統(tǒng)的研究,為該病的預(yù)防和控制提供理論基礎(chǔ)。 本試驗(yàn)共分為3部分： 試驗(yàn)一、大腸桿菌

2、、沙門氏菌和葡萄球菌多重PCR檢測方法的建立 根據(jù)GenBank中已發(fā)表的大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌保守基因序列設(shè)計(jì)合成3對特異性引物,建立了大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌多重PCR檢測方法,并進(jìn)行靈敏性試驗(yàn)、特異性試驗(yàn)。特異性試驗(yàn)結(jié)果表明該研究建立的大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌多重PCR檢測方法只能擴(kuò)增出大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌相對應(yīng)的特異性目的片段,鏈球菌、副雞嗜血桿菌等均為陰性；敏感性試驗(yàn)結(jié)果表明建立的該方法能同時(shí)檢測

3、出10ng的大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌,大腸桿菌和沙門氏菌的最低檢出限量為100pg。進(jìn)而說明該研究建立的大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌多重PCR檢測方法敏感性高、特異性強(qiáng),適用于大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌的流行病學(xué)調(diào)查研究。 實(shí)驗(yàn)二、REV、H9N2、CIAV和VAV多重PCR檢測方法的建立 該研究根據(jù)REV、VAV和H9N2亞型禽流感病已發(fā)表的基因序列設(shè)計(jì)合成4對特異性引物,建立了多重PCR檢測方法。特異性試驗(yàn)結(jié)果

4、表明建立的該方法只能擴(kuò)增出相應(yīng)病毒,其它病毒擴(kuò)增結(jié)果均為陰性；敏感性試驗(yàn)結(jié)果表明建立的該多重PCR檢測方法最低能同時(shí)擴(kuò)增出10-5稀釋的病毒核酸。以上研究結(jié)果表明該研究建立的多重PCR檢測方法是一種靈敏度高、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確、快速的檢測方法,為網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生征病毒、傳染性貧血病毒、呼腸孤病毒和H9N2亞型流感病毒流行病學(xué)調(diào)查和診斷提供一種良好的方法。 實(shí)驗(yàn)三、山東省某規(guī)?；N雞場致雞胚死亡原因的流行病學(xué)調(diào)查 用建立的多重