SSTR2A、SSTR5與EGFR蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其意義.pdf

1、一、研究背景 肺癌是世界上最常見的五大惡性腫瘤之一：且發(fā)病率和死亡率近年來迅速上升，躍居腫瘤第一位。雖然治療技術(shù)上有了很大的提高，但5年生存率沒有明顯改善。目前非小細(xì)胞肺癌的治療除手術(shù)、化療、放療及免疫治療外，針對(duì)于不同靶點(diǎn)的分子靶向治療正逐漸應(yīng)用于臨床。 生長抑素受體(Somatostatin receptor，SSTR)作為基因的腫瘤標(biāo)記物之一，正逐步受到研究者的重視。隨著生長抑素受體5種亞型先后被克隆，人們對(duì)生長抑

2、素受體家族各成員的氨基酸序列、分子生物學(xué)特性、在正常組織和腫瘤組織中的分布和表達(dá)及其特異性配體等方面的研究也進(jìn)一步深化。既往通過對(duì)腫瘤標(biāo)本組織切片，以放射自顯影法及腫瘤勻漿的配體結(jié)合分析法觀察，證實(shí)在多種神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中存在著SSTR的高密度表達(dá)。90年代以來，采用先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)，檢測SSTR各亞型的mRNA(包括原位雜交法、RT-PCR法及Norhern印記法等)，發(fā)現(xiàn)SSTR在各類內(nèi)分泌腫瘤中的表達(dá)陽性率在7096以上。近年來

3、通過放射免疫顯像發(fā)現(xiàn)除神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤外，一些非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中(如乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌和結(jié)腸癌等)中均含有足以進(jìn)行閃爍顯像的高密度SSTR。為腫瘤的定位診斷、鑒別診斷及腫瘤受體的靶向藥物治療提供了有效依據(jù)。關(guān)于SST抗腫瘤增殖的機(jī)理，認(rèn)為系由存在于瘤細(xì)胞中的SSTR直接介導(dǎo)抑制生長因子受體激酶的有絲分裂信號(hào)，從而導(dǎo)致腫瘤生長停滯或腫瘤細(xì)胞凋亡，或通過腫瘤周血管壁內(nèi)高密度表達(dá)的SSTR抑制血管形成和促進(jìn)血管強(qiáng)烈收縮，以及調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞等環(huán)節(jié)

4、發(fā)揮抑癌效應(yīng)。SST有可能作為一種重要的細(xì)胞增殖和分化的激素調(diào)節(jié)肽，其抑制腫瘤細(xì)胞增殖的效應(yīng)，將使SST及其多種類似物(SSA)，具有發(fā)展成為抗腫瘤藥物的樂觀前景。EGFR在多種惡性腫瘤包括非小細(xì)胞肺癌中高表達(dá)，與腫瘤細(xì)胞的增殖、腫瘤血管生成、黏附、侵襲、轉(zhuǎn)移和腫瘤細(xì)胞的凋亡等密切相關(guān)。由于EGFR酪氨酸激酶是信號(hào)傳導(dǎo)的必要條件，因而成為腫瘤治療的重要靶分子。本研究通過免疫組織化學(xué)的方法檢測SSTR亞型SSTR2A、SSTR5與表皮生長

5、因子受體(Epidermal growth factot receptor； EGFR)在非小細(xì)胞肺癌(non-small-cell lung cancer;NSCLC)組織和癌旁正常肺組織中的表達(dá)，探討與臨床病理因素之間的關(guān)系，及兩者之間的相關(guān)性和預(yù)后生存期的隨訪。為非小細(xì)胞肺癌的靶向治療提供新的治療思路。二、研究對(duì)象和方法1、研究對(duì)象：收集濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院胸外科及齊魯醫(yī)院1999年8月至2005年2月行根治性手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的非小

6、細(xì)胞肺癌石蠟標(biāo)本69例，研究組(62例)：非小細(xì)胞肺癌組織；對(duì)照組(7例)：癌旁肺組織7例(距腫塊10cm以上)。 二、實(shí)驗(yàn)方法：所有標(biāo)本均經(jīng)10﹪福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，采用兔抗人SSTR2A多克隆抗體、SSTR5多克隆抗體和EGFR單克隆抗體免疫組織化學(xué)標(biāo)記、以DAB顯色系統(tǒng)顯色，來顯示石蠟切片中SSTR2A、SSTR5和EGFR蛋白的表達(dá)。運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析各組數(shù)據(jù)，結(jié)合臨床病理資料(腫瘤的大小、患者年齡、性別、

7、腫瘤組織類型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等)，探討三種蛋白在62例NSCLC組織和7例癌旁正常肺組織中的表達(dá)情況及與肺癌臨床病理特征的關(guān)系，并進(jìn)行預(yù)后隨訪。 三、結(jié)果：切片組織中SSTR2A表達(dá)呈細(xì)胞膜棕黃色的顆粒狀分布，SSTR5表達(dá)定位于細(xì)胞漿和細(xì)胞膜上，EGFR染色主要分布于細(xì)胞膜和細(xì)胞漿，呈彌漫性或顆粒性著色。 1、7例癌旁肺組織中未發(fā)現(xiàn)EGFR蛋白的表達(dá)；SSTR2A和SSTR5的在癌旁肺組織中的陽性表達(dá)率分別為1

8、/7和2/7。 2、62例非小細(xì)胞肺癌組織中，SSTR2A蛋白陽性表達(dá)30例，占48.3﹪；SSTR5陽性表達(dá)44例，占70.9﹪。EGFR有35例陽性，占56.4﹪； 3、SSTR2A、SSTR5蛋白表達(dá)與NSCLC的TNM分期有密切關(guān)系(P(0.05)。但與NSCLC患者的年齡、性別、吸煙與否、病理類型、腫瘤大小和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無明顯相關(guān)(P>0.05)。同組中， EGFR蛋白的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者的年齡、性別、吸煙

9、與否、腫瘤組織類型、腫瘤大小、TNM分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無顯著差異(P>0.05)。SSTR2A、SSTR5蛋白表達(dá)與EGFR蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。 4、SSTR2A表達(dá)陽性組的3年生存率為64.52﹪，高于陰性組45.16﹪，Log-rank檢驗(yàn)：4.56。兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(0.05)。SSTR2A陰性組的中位生存期為32個(gè)月，低于陽性組的中位生存期36個(gè)月(P=0.326，P>0.05)。SSTR5表達(dá)陽性

10、組的3年生存率為65.91﹪，高于陰性組22.22﹪，Log-rank檢驗(yàn)：4.01(P<0.05)。兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SSTR5表達(dá)陰性組的中位生存期為32個(gè)月，低于陽性組的中位生存期40個(gè)月(P=0.453，P>0.05)。EGFR表達(dá)陰性組3年生存率為69.44﹪高于陽性者30.77﹪’Log-rank檢驗(yàn)：12.41。兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。EGFR表達(dá)陽性組的中位生存期為24個(gè)月，低于陰性組的中位生存期50個(gè)