犬皮膚真菌病治療藥物的篩選與臨床療效試驗.pdf

1、犬皮膚真菌病是寵物門診的常見病、多發(fā)病，為人畜共患，嚴(yán)重影響了動物及人類的健康。臨床上多選用抗真菌藥物治療，但現(xiàn)有療法所用藥物價格昂貴，具有明顯的副作用。近來隨著耐藥菌株的不斷出現(xiàn)，并根據(jù)該病的臨床復(fù)發(fā)率增高等問題，促使廣大科研工作者不斷尋找新型廣譜、高效、廉價的抗真菌藥物，中藥是我國的傳統(tǒng)優(yōu)勢資源，其作用和相對安全性己得到廣泛的認(rèn)可，中藥抗真菌藥物研究也已取得許多進(jìn)展。本研究選取31味中草藥，針對分離自臨床皮膚真菌病患犬的特定菌株，進(jìn)

2、行單味中藥和復(fù)方中藥的研究。旨在研制一種具有抑真菌活性的中西藥結(jié)合處方。本研究包括如下內(nèi)容： 1.病原真菌的分離培養(yǎng)與鑒定 旨在分離幾種常見的犬皮膚真菌病致病真菌。針對臨床皮膚病患犬，經(jīng)實驗室檢查確診為皮膚真菌病。采毛樣接種于沙氏葡萄糖蛋白胨瓊脂平面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)7—14 d，觀察菌落生長特征并結(jié)合顯微鏡檢查進(jìn)行真菌鑒定。獲得4種病原真菌，分別是犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌、絮狀表皮癬菌和馬拉色菌。 2.中西結(jié)合抗

3、皮膚真菌病藥物的研制 選擇31種具有抑真菌活性的中藥，采用試管內(nèi)藥基法比較這些藥物的抑真菌作用，篩選出12味效果較好的藥物；再用試管內(nèi)藥基法測定這12味中藥的最小抑菌濃度(MIC)。選用3種抗真菌西藥，測定其MIC值。根據(jù)上述抑菌效果，設(shè)計2個中藥組方，以篩選出較好的復(fù)方組合。采用3因素3水平正交設(shè)計實驗，同時引入臨床已有成方作為對照組，最終篩選出體外抑真菌效果優(yōu)良的中西藥復(fù)合處方，命名為“復(fù)方抗癬劑”：以黃芩、玄參、川芎、土槿

4、皮、厚樸等5味中藥為主，濃度為50 mg/mL，再輔以冰醋酸，調(diào)整濃度為1.25 mg/mL。 3.自制復(fù)方抗癬劑的刺激性和安全性實驗 用自制復(fù)方抗癬劑涂布脫毛后的大白兔皮膚，觀察多次給藥(3次/d，5 mL/次，連用7d)后對完整皮膚及受損皮膚的刺激性反應(yīng)；選取昆明小鼠，灌胃給藥(折合日用藥量為：中藥36000 mg/kg、冰醋酸3600 mg/kg)，測定其最大耐受量(MTD)，連續(xù)用藥7d。結(jié)果表明，該復(fù)方抗癬劑無

5、皮膚刺激性，無毒性，屬實際無毒類藥物。 4.復(fù)方抗癬劑的藥效學(xué)研究 將4只健康犬隨機(jī)分為治療組(3只)和對照組(1只)，分別從每只犬的頭、嘴、耳、背、腹、前肢、后肢和尾部8個部位取樣，進(jìn)行真菌分離培養(yǎng)和鑒定。治療組用自制復(fù)方抗癬劑全身藥浴，2次/周，30 min/次；結(jié)合使用復(fù)方抗癬劑制成的喯劑噴涂于取樣部位，5 mL/次，2次/d，連用14 d；對照組僅采取常規(guī)洗浴。用藥后再次從取樣部位拔毛分離培養(yǎng)，結(jié)果表明3只受試犬